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2015年高考生物二轮专题复习
提能专训(十五) 基因工程、细胞工程
1.植物叶肉细胞原生质体的分离和培养的主要过程可用如图所示图解简单表示:
(1)培育胚状体利用了________________这一项生物技术,胚状体再继续培养,则可培育出完整的植株,这体现了________________。培养基中除了含有一定的营养外,还必须含有________________等植物激素,还需要对培养基进行严格的____________________。
(2)如果愈伤组织是三七叶肉细胞培养产生的,若为了获得三七的细胞产物,则只需培养到______________;若为了获得三七的人工种子,则需要培养到______________。如果愈伤组织是棉花叶肉细胞培养产生的,通过基因工程要获取抗虫棉,目的基因导入棉花愈伤组织细胞常用的方法是______________法。
(3)从叶片的叶肉细胞到获得胚状体的过程中,必须要经过______________。
无丝分裂 有丝分裂 减数分裂原代培养
传代培养 植物体细胞杂交细胞融合 脱分化 再分化
答案:(1)植物组织培养 植物细胞的全能性 细胞分裂素、生长素 灭菌 (2)愈伤组织 胚状体 农杆菌转化 (3)
解析:(1)离体植物细胞通过脱分化形成愈伤组织,通过再分化形成具有根和芽的胚状体,再通过细胞分裂、分化发育成一个完整的植株。该技术为植物组织培养,其原理为植物细胞的全能性。培养基的成分为水、无机盐、维生素,氨基酸、蔗糖、植物激素(生长素和细胞分裂素等)等;培养基要求进行严格的灭菌。(2)三七的细胞产物为细胞的代谢产物,将三七叶肉细胞培养到愈伤组织即可;获得人工种子需培养至胚状体;棉花为双子叶植物,导入抗虫基因常用农杆菌转化法。(3)离体叶肉细胞培养到胚状体的过程中必须经过脱分化和有丝分裂形成愈伤组织,再分化和有丝分裂形成具有根和芽的胚状体。
2.(2014·东城区检测)大肠杆菌pUC18质粒是基因工程中常用的运载体。某限制酶在此质粒上的唯一酶切位点位于LacZ基因中,如果没有插入外源基因,LacZ基因便可表达出β-半乳糖苷酶。当培养基中含有IPTG和X-gal时,X-gal便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落。反之,则形成白色菌落。下图表示利用此质粒实施基因工程的主要流程。请分析并回答问题。
(1)对已获得的目的基因可利用________技术进行扩增。
(2)目的基因插入质粒构建重组质粒的过程中,需要DNA连接酶恢复________键。
(3)将试管中的物质和大肠杆菌共同置于试管的目的是__________;大肠杆菌需事先用Ca2+进行处理,目的是__________________________。
(4)将试管中的菌液接种于选择培养基上培养,培养基中应含有大肠杆菌必需的营养物质________________和生长因子,还应加入IPTG、X-gal以及氨苄青霉素,其中加入氨苄青霉素的作用是筛选出__________________。
(5)若观察到培养基上出现________色菌落,则说明大肠杆菌中已成功导入了重组质粒。如果作为受体细胞的大肠杆菌也含有LacZ基因,则不利于重组质粒的筛选,原因是________________。
答案:(1)PCR (2)磷酸二酯 (3)进行转化 使大肠杆菌细胞处于感受态 (4)碳源、氮源、无机盐、水 导入pUC18质粒的大肠杆菌 (5)白 无论大肠杆菌中是否导入重组质粒,均会呈现蓝色菌落
3.根据相关信息回答问题。
据报道,科学家发现了“核糖开关”。核糖开关是自然界细菌、一些植物中天然存在的、有调控作用的传感器,位于细菌等生物体内特定的非翻译区RNA序列区域,核糖开关无需依赖任何蛋白质而直接结合小分子代谢物,从而发生结构变化,参与调控生物的基本代谢。借助核糖开关,这些细菌能“一对一”地识别氨基糖苷类抗生素,进而产生相应的酶,将抗生素灭活。长久以来,以庆大霉素和新霉素等为代表的氨基糖苷类抗生素,临床上主要用于治疗一些由“敏感需氧革兰氏阴性杆菌”所导致的脑膜炎、肺炎和关节炎等感染,但具有“核糖开关”的细菌却能导致此类抗生素失效,现在,人类有望通过阻止核糖开关的功能,使细菌失去抗药性。
(1)核糖开关________(填“能”或“不能”)作为基因工程的载体,因为________;合成“核糖开关”需要________聚合酶。
(2)若某种蛋白质X经过修饰后即能阻止核糖开关的功能,人们可以通过修饰过的蛋白质X的三维结构推测其应有的__________序列,进而找到相对应的________,再通过动物细胞培养技术,获得大量的修饰过的蛋白质X。获得蛋白质X基因及将基因转移至受体细胞的技术称为________。
(3)利用动物细胞生产能阻
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