生化实验技术理论-电泳技术教案分析.ppt

电 泳 技 术 电泳的概念 电泳技术分类 电泳技术基本原理 几种常见电泳方法的比较 聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS分离蛋白质 一、电泳的概念 任何一种物质的质点，由于其本身在溶液中的解离或由于其表面对其他带电质点的吸附，会在电场中向一定的电极移动。 带电质点在电场中移动的现象。 二、电泳技术分类 三、电泳技术基本原理 1、基本原理 不同的带电颗粒在同一电场中泳动速度，主要与其所带净电荷量，分子量及分子形状有关。 pH pI 分子带负电荷，在电场中向正极移动; pH pI 分子带正电荷，在电场中向负极移动; 泳动度：带电质点在单位电场强度下的泳动速度。 2.影响电泳速度的因素 (1) 电场强度 泳动速度与电场强度成正比 常压电泳(100-500V)：2-10V/cm，几小时或几天；蛋白质等大分子物质; 高压电泳(500-1000V)：20-200V/cm，几分钟；氨基酸、小肽、核苷酸等小分子物质; （2）溶液的pH值 pH距待分离物质的pI越远，泳动速度越大； （3）溶液离子强度 离子强度越小,电动势越大,泳动速度越快。 （4）电渗现象：在电场中，液体对于固体支持物的相对移动。 四、几种常见电泳的比较 五、聚丙烯酰胺凝胶电泳 1.原理 具有电泳和分子筛的双重作用 2.聚丙烯酰胺凝胶的聚合 单体：丙稀酰胺（Acr） 交联剂：甲叉双丙稀酰胺交联剂(Bis)