实验三 环境和人体微生物的检验及无菌操作技术 目 的 要 求 掌握从土壤中分离微生物的方法,通过检测环境和人体中微生物的存在,体会微生物分布的广泛性。 学习无菌操作的技术,掌握平板划线分离微生物的方法。 实 验 原 理 自然环境中和人及动物的体表、体内都存在大量的微生物,它们一遇到适合的条件就会大量繁殖。当把取自不同来源的含菌样品接种于含有生长发育需要的各种营养成分的固体培养基时,就会形成肉眼可见的微生物集体群落。 每种微生物群落都有其独有的特点,如大小、颜色、表面干燥或湿润、隆起或扁平、粗糙或光滑、边缘整齐或不整齐等。因此,可以通过平板培养来检测不同环境下微生物的数量、种类和特点。 实 验 材 料 培养基:牛肉膏蛋白胨培养基(PCA)、马铃薯葡萄糖培养基(PDA )、改良高氏1号培养基; 土 样:地面以下5-10cm的土壤; 其 他:酒精灯、无菌棉棒、无菌生理盐水、涂布棒、记号笔、培养皿、吸管、磁力搅拌器; 制备土样悬浊液:称取土样1g,迅速倒入盛有99ml无菌水和玻璃球的三角瓶中,置入磁力棒,搅拌10-15min,使土样充分打散,即成10-2的土壤悬浊液。 稀释:用无菌移液管吸10-2的土壤悬液1mL,放入9mL无菌水中即为10-3稀释液,如此重复,可依次制成10-3~10-6的稀释液。 (注意:操作时每一个稀释度换用
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