微生物及无菌操作解剖.ppt

1传统的棉拭子法：用无菌的棉拭子在口腔中对应的左上、坐下、右上、右下四个方位采集。 2用生理盐水漱口后同样方法检测。 3采集的位置：口腔侧壁，牙龈、沟。 口腔中细菌采集 1用无菌棉签擦拭手机的正面、方面和侧面，然后将棉签在培养基上做涂布法涂布。 2将手机用75％的酒精擦拭后再用无菌棉签擦拭，再将棉签进行涂布法涂布。 手机上细菌采集 直接将纸币在培养基上轻轻按上即可。 用75％的酒精擦拭钱包表面，再用无菌棉签擦拭再在培养基上做涂布。 直接用无菌棉签擦拭钱包表面直接涂布。 钱与钱包上的细菌采集 Thanks 显微镜下区别细菌和真菌 显微镜下真菌和细菌的形态差别还是很明显的，细菌一般都要经过染色之后才能观察。而真菌个体要大些，产孢结构明显，孢子链形态多样，有串生、簇生、帚状枝等等，所以一般都能够直接观察。 如果要更细致的观察我们就要： 因为实验室一般常用普通的光学显微镜。但是由于细菌体积小且透明，活体细胞内含有大量水分，因此，对光线的反射与吸收差别不大。当把细菌悬浮在水滴内，放在显微镜下观察时，由于与周围背景没有显著的明暗差，难以看清他们的形状，更谈不上其细微结构。经过染色，就可借助颜色的反衬作用比较清楚地观察微生物的形状和结构，亦即菌体表面及内部结构着色与背景成鲜明对比，这样便可在普通光学显微镜观察形态和结构，而且还可以通过不同染色反应来区别微生物类型以及死.活细菌。因此，必须用染色的方法来区别。 学习是一本打开的书,你能从中看出未来的抱负 微生物及无菌操作 微生物是什么 微生物是广泛存在于自然界的一群体形微小（直径小于1mm）、结构简单、肉眼看不见，必须藉助光学或电子显微镜放大数百至数万倍才能观察到的生物。需要说明的是，微生物是一个比较笼统的概念，界线有时非常模糊。如单细胞藻类和一些原生动物也应算是微生物，但通常它们并不放在微生物中进行研究。 微生物具有以下特点：①体积小，面积大；②吸收多，转化快（2000倍体重/h）；③生长旺，繁殖快（20min分裂一次）；④易变异，适应强；⑤分布广，种类多（10万种以上）。 Microorganism 我们所生活的环境中，到处都存在着大量的微生物。在一般空气中，微生物达800~3500个/m3，在土壤中达1~500×108个/g，在严重污染的水中可达107个/ml。（饮用水要求细菌总数≤100个/ml，大肠杆菌≤3个/ml。经水塔或贮水池贮存后，短期内可繁殖至105~106个/ml。）人的头皮上有140万个/cm2，两手上约有4~40万个，1g指甲污垢有38亿个，1g粪便可达10~1000亿个。可以说微生物是无处不在，无处不有。许多以前被人们认为是极端（高温、高压、强酸、强碱、低温等）甚至是致死的环境，现在已发现生活着各种类型的微生物（称为极端微生物）。事实说明，微生物有特别顽强的生存、繁殖和变异能力来适应环境。 微生物种类繁多，有的对人有益，有的有害，有的无益也无害。但在药品生产过程中，不可能对环境中的各种微生物加以区别对待，为保证药品的安全有效，需要对其进行控制。空气中的微生物多数附着在灰尘上，或以芽孢形式悬浮于空气中，1μm以下者处于悬浮状态，10μm以上者会逐渐沉下来而形成菌尘。所以也要对尘粒进行控制。 大量临床资料表明，注射剂（尤其是静脉注射剂）如污染了7~12μm的尘粒，可导致热原反应、肺动脉炎、微血栓或异物肉芽肿等，严重的还会致人死命。而如果污染了细菌，轻则局部红肿化脓，重则引起全身细菌性感染。因此，对微生物和尘粒进行更加严格的控制对于针剂生产洁净室非常重要。 人是洁净室最大的污染源，占90%左右。一般男性每人每分钟向周围排放1000个以上的含菌粒子，女性为750个以上。穿无菌服时，静止时的发菌量为10~300个/min，一般活动时发菌量为150~1000个/min，行走时发菌量为900~2500个/min。咳嗽一次发菌量为70~700个/min，喷嚏一次为4000~60000个/min。所以在洁净室中，人的数量和活动应有特别严格的限制。 “无处不在的微生物” 1．营养物：水分、碳源、氮源、无机盐类 、生长因子 。 2．pH值：各种微生物都有其最适宜的pH值，大多数细菌最适pH为6.8~7.4，但一般有较大的容忍度，在4~9也可存活和生长，少数细菌能在极端pH值范围内生长。真菌适于pH值3~6的微酸性环境，但在2~10也可生长。 3．温度：微生物适于生长繁殖要有适宜的温度，当超过其最低或最高可耐受的温度时，即停止生长或死亡。一般细菌最适温度为30~40℃，真菌为20~30℃。 4．氧气：大多数细菌和所有霉菌都是需氧菌（在有氧环境中才能生长），少数细菌是厌氧菌（在无氧环境中才能生长），有些细菌和酵母菌是兼性需氧厌氧的，在有氧或无氧环境中都能生长繁殖