第十一章维生素的测定解析.pptVIP

（三）水溶性维生素的测定 二、各种维生素 的测定方法 根据上述性质，测定水溶性维生素时，一般都在酸性溶液中进行前处理。 维生素Bl、B2 盐酸水解 酶解 提取 纯化 维生素C通常采用草酸、草酸—醋酸、偏磷酸—醋酸溶液直接提取。在一定浓度的酸性介质中，可以消除某些还原性杂质对维生素C的破坏作用。草酸价廉，使用方便，对维生素C有很好保护作用。 淀粉酶、 木瓜蛋白酶 活性人造浮石、 硅镁吸附剂 （三）水溶性维生素的测定 二、各种维生素 的测定方法 维生素C是一种己糖醛基酸，有抗坏血病的作用，所以又称作抗坏血酸。维生素C广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑桔等食品中含量尤丰富。 维生素C具有较强的还原性，对光敏感，氧化后的产物称为脱氢抗坏血酸，仍然具有生理活性。进一步水解则生成2，3 -二酮古乐糖酸，失去生理作用。 1.维生素C的测定 （三）水溶性维生素的测定 二、各种维生素 的测定方法 维生素C具有烯二醇结构，具有较强的还原性，可发生氧化还原反应；对光敏感，氧化后的产物称为脱氢抗坏血酸，仍然具有生理活性。进一步水解则生成2，3 -二酮古乐糖酸，失去生理作用。 与糖类似的结构：具有糖类似的性质和反应，可用于鉴别。 1.维生素C的测定 （三）水溶性维生素的测定 二、各种维生素 的测定方法 总维生素C包括：还原型、脱氢型及二酮古乐糖酸。 维生素C常用的测定方法有 1.维生素C的测定 测定方法 二氯靛酚法（还原型VC） 荧光法 2，4-二硝基苯肼法 （总VC） 碘酸法 碘量法 （三）水溶性维生素的测定 二、各种维生素 的测定方法 （一）二氯靛酚法（测定还原型抗坏血酸， GB/T 6195—86 ） 原理 1.维生素C的测定 还原型 抗坏血酸 还原型2，6-二氯靛酚（无色） H+ 2，6-二氯靛酚（粉红色） + 脱氢型 抗坏血酸 + 还原型抗坏血酸可以还原染料2，6-二氯靛酚。该染料在酸性溶液中呈粉红色(在中性或碱性溶液中呈蓝色)，被还原后颜色消失。 还原型抗坏血酸还原染料后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准染料液的量，与样品中抗杯血酸含量成正比。 （三）水溶性维生素的测定 二、各种维生素 的测定方法 试剂 1.维生素C的测定 （1）2%草酸溶液 （2）0.000167mol/L KIO3标液 （3）1%淀粉溶液； （4）6%KI溶液； C6H8O6＋I2= C6H6O6＋2HI ＩＯ3(-)+5 I(-)+6 H(+)=3 I2+3 H2O （5）抗坏血酸标准溶液(1mg/ml)——需标定 标定：吸标液（VC）5ml于三角瓶→加6%KI溶液0.5ml→加1%淀粉3滴→用0.00167mol/L KIO3标液滴定到淡兰色。 二氯靛酚法 （三）水溶性维生素的测定 二、各种维生素 的测定方法 试剂 1.维生素C的测定 （6）0.02%2，6—二氯靛酚溶液 标定：吸5ml已知浓度V C标液 → 加5ml 1%草酸 → 用染料2，6-二氯靛酚滴定至溶液呈粉红色，在15秒不褪色为终点。 计算：每毫升2，6-二氯靛酚相当于维生素C的毫克数等于滴定度（T） 二氯靛酚法 （三）水溶性维生素的测定 二、各种维生素 的测定方法 测定步骤 1.维生素C的测定 样品 还原型Vc的提取 还原型Vc的测定 （1）提取 鲜样的提取：称100g鲜样加等量1%草酸溶液，倒入捣碎机中打成匀浆，取10-40g匀浆（含1-2 mg抗坏血酸）倒入100ml容量瓶中，用1%草酸溶液稀释定容，混匀。 干样的制备：称1-4g （含1-2 mg抗坏血酸）放入研钵内，加入1%草酸溶液磨成匀浆，用草酸溶液定容到100ml。 上述溶液若颜色深，可加入白陶土，将上述溶液过滤，滤液备用。 二氯靛酚法 （三）水溶性维生素的测定 二、各种维生素 的测定方法 测定步骤 1.维生素C的测定 （2）滴定 吸取5-10ml滤液，置于50ml三角瓶，快速加入2,6—二氯靛酚溶液滴定，直到红色不能立即消失，而后再尽快，逐滴加入，以呈现的粉红色在15秒内不消失为终点。 二氯靛酚法 （三）水溶性维生素的测定 二、各种维生素 的测定方法 计算 1.维生素C的测定 V ---消耗染料体积（ml） V0---滴定空白时所消耗的燃料的体积（ml） T --1ml染料所能氧化维生素C的毫克数 含有样品的克数 M---滴定时所取滤液中含样品重量，g 二氯靛酚法 （三）水溶性维生素的测定