第5组短命植物对盐胁迫的生理响应概论.pptVIP

短命植物对盐胁迫的生理响应 组长：吴凯凯 组员：张玲、杨春艳、 禹飞雄、翟鹏飞 过氧化物酶活性的测定 一、实验目的 过氧化物酶是植物体内重要的呼吸酶类，其活性高低与酶类物质代谢，植物抗性密切相关。通过实验掌握提取POD和测定其活性方法和原理。 二、实验原理 过氧化物酶催化H2O2氧化酶类，生成醌类化合物，此化合物进一步缩合或与其它分子缩合，产生颜色较深产物。本实验以愈创木酚为底物，过氧化物酶催化H2O2将愈创木酚氧化成茶褐色产物，次产物在470nm波长处有最大吸收峰，故可通过测定470nm波长下的吸收光度变化得知过氧化物酶的活性。 三、材料与试剂及仪器 材料：马铃薯 试剂：20m mol/L KH2PO4,反应混合液 仪器：分光光度计，研钵，恒温水浴锅， 100 mL 容量瓶，吸管， 离心机。 四、方法步骤： 1、 酶液制备：称取材料1.079g，加入20m mol/L KH2PO4 5ml,于研钵中研磨成匀浆，在 3000r/min，下离心10min,上清液转入25ml,容量瓶，残渣再用5ml, KH2PO4,提取一次，定容，混匀，贮于冷凉处备用。 （反应混合液： 100 mol ／ L 磷酸缓冲液（ pH6.0 ） 50 mL 于烧杯中，加入愈创木酚 28 μl ，于磁力搅拌器上加热搅拌，直