细胞生物学第十三章性细胞死亡与细胞衰老精读.ppt

第十三章 程序性细胞死亡与细胞衰老 第一节 程序性细胞死亡 一、动物细胞的程序性死亡 二、植物细胞与酵母的程序性死亡 第二节 细胞衰老 一、细胞衰老的概念及特征 二、细胞衰老的分子机制 三、细胞衰老与个体衰老和癌症的关系 第一节 程序性细胞死亡 程序性细胞死亡：细胞死亡受到细胞内部某种由遗传机制决定的“死亡程序”控制。 动物细胞的死亡方式：凋亡、坏死、自噬 一、细胞凋亡 （一）细胞凋亡的概念与特征 1、细胞凋亡的概念：是受基因调控的生理性细胞自杀行为。 第一节 程序性细胞死亡 2、细胞凋亡的特征 凋亡起始：染色质固缩并沿核膜分布，细胞质发生皱缩，细胞表面特化结构消失。 凋亡小体形成: 细胞质膜反折，包围染色质片段和细胞器等，形成芽状突起并逐渐分隔，形成凋亡小体。 凋亡小体被吞噬: 凋亡小体被邻近的细胞或吞噬细胞所吞噬，并被消化后重新利用。 （二）、细胞凋亡的检测方法 1、形态学观察：染色法、透射和扫描电镜 观察 2、DNA电泳：DNA片段呈现出梯状条带 3、TUNEL测定法：即DNA断裂的原位末端标记法 4、彗星电泳法 5、流式细胞分析 （三）、细胞凋亡的生化特征 细胞凋亡的主要特征是形成大小为180～200bp特征性的DNA ladders。 凋亡细胞组织转谷氨酰胺酶tTG（tissue Transglutaminase）积累并达到较高水平。 第一节 程序性细胞死亡 （四）、细胞凋亡的生物学意义 对动物个体的正常发育、自稳态的维持、免疫耐受的形成、肿瘤监控等多种生理及病理过程具有重要意义。 （五）、细胞凋亡的分子机制 诱导细胞凋亡的因素有多种，包括物理性因子、化学及生物因子。 1、线虫的细胞凋亡相关基因—ced基因 Ced3哺乳类同源物是ICE(Interleukin-1-converting enzyme)，即Caspase1 2、caspase 家族（杀手蛋白酶）与凋亡 Caspase活性位点是半胱氨酸(Cysteine)，裂解靶蛋白位点是天冬氨酸残基后的肽键，因此称为Cysteine aspartic acid specific protease，即Caspase。Caspase并不完全降解某一蛋白质。 Caspase的种类：现已确定15种Caspase。①Caspase-1和-11主要负责白介素前体的活化，不直接参与凋亡信号的传递。②凋亡起始者，Caspase-2，-8，-9，-10，负责切割执行者的前体，活化执行者。③凋亡执行者，Caspase-3，-6，-7，活化后负责切割细胞结构蛋白和调节蛋白。 Caspase的底物：裂解核纤层蛋白，导致细胞核形成凋亡小体；裂解DNase结合蛋白，使DNase释放，降解DNA形成DNA Ladder;裂解参与细胞连接或附着的骨架和其他蛋白，使凋亡细胞皱缩、脱落，便于细胞吞噬；导致膜脂PS重排，便于吞噬细胞识别并吞噬。 （3）Caspase依赖性的细胞凋亡 主要通过两条途径引发：①由死亡受体起始的外源途径；②由线粒体起始的内源途径。 外源途径：胞外配体（Fasl或TNF）→受体（质膜表面分子Fas或TNF受体）→募集接头蛋白和起始Caspase酶原形成死亡诱导信号复合物（DISC）→起始Caspase活化→执行Caspase活化→细胞凋亡。 内源途径：内部或外部凋亡信号的刺激→线粒体外膜通透性改变→向胞质释放凋亡相关因子（细胞色素c）→细胞色素c与Apaf-1及Caspase- 9前体形成凋亡复合体（apoptosome）→Caspase-9活化→执行Caspase活化→细胞凋亡。 内源途径中，细胞色素c的释放是关键步骤。线粒体通透性主要受Bcl-2蛋白家族的调控。Bcl-2是线虫抗凋亡蛋白Ced-9在哺乳类中的同源物，Bcl-2蛋白家族通常含有BH结构域，根据功能分为两组：Bcl-2，Bcl-xL，Bcl-w等抑制细胞凋亡；Bax，Bak，Noxa等促进细胞凋亡。 4、生死抉择——细胞凋亡的调控 细胞中存在Caspase抑制因子，能够直接与Caspase活性分子结合，阻抑对其底物的切割作用。如c-IAP（inhibitor of apoptosis）家族、c-FLIP、BAR和ARC等。 细胞存活因子包括多种有丝分裂原和生长因子。它们与细胞表面受体结合后，启动细胞内信号通路，抑制凋亡的发生。在抗凋亡、促存活的信号通路中，NF-kB处于中心地位。 p53是细胞内的一种转录因子，它是重要的促凋亡因子和肿瘤抑制因子。 二、细胞坏死 当细胞凋亡不能正常发生而细胞必须死亡时，坏死作为凋亡的“替补”方式被细胞采用；此外，分裂旺盛细胞的DNA被持续损伤，也能引发细胞坏