医学分子生物学-8详解.ppt

转录水平调控是基因表达调节重要的环节。涉及染色质区域结构重塑、组蛋白和DNA修饰、转录因子和RNA聚合酶功能的增强或抑制等。 这些调控作用除了许多蛋白质参与，也有非编码RNA参与。调控机制主要涉及非编码RNA与DNA及蛋白质的相互作用。 一、非编码RNA参与调控染色质结构 染色质结构变化包括区域结构重塑、组蛋白修饰、DNA修饰等。这些变化可决定基因表达的开放和关闭，其调控涉及许多蛋白质的作用，而非编码RNA,特别是lncRNA具有重要作用。 （一）lncRNA促进形成致密染色质结构 （二）lncRNA通过募集染色质重塑复合体调 控组蛋白修饰 （三）miRNA可间接影响组蛋白修饰 （四）非编码RNA调控DNA甲基 二、非编码RNA调控转录因子的作用 转录因子和转录调控蛋白的激活和功能调控是基因表达的重要调控方式。 一些lncRNA与转录调控蛋白相互作用，调控其功能活性，从而影响基因的转录。 lncRNA可作为转录的共激活因子(coactivator)或共阻遏因子(corepressor)而发挥作用。 三、非编码RNA影响RNA聚合酶Ⅱ的转录功能 lncRNA能直接与蛋白质相互作用，使得某些lncRNA可直接与RNA聚合酶相互作用，对转录产生影响。 四、 lncRNA影响mRNA转录后加工和运输 mRNA转录后加工和运输涉及许多蛋白质作用。 lncRNA能够直接与蛋白质相互作用，也可通过互补序列与mRNA结合。 不同lncRNA可能通过不同机制影响蛋白质的功能，从而对mRNA转录后加工和运输产生影响。 第四节非编码RNA调控蛋白质合成 一、 miRISC结合靶mRNA而抑制翻译 miRNA的主要功能是调控翻译，而且以负调控作用为主。 但miRNA并不是与mRNA简单互补结合而抑制翻译，而是通过与蛋白质结合形成复合物，即miRNA诱导沉默复合物(miRISC) 对翻译过程产生抑制作用。 二、 lncRNA干扰mRNA的翻译 lncRNA也可通过特定机制对翻译产生抑制作用，包括抑制翻译所需的蛋白质和募集翻译的阻遏蛋白。 三、 非编码RNA促进mRNA降解而抑制翻译 lncRNA可通过影响RNA结合蛋白(RBP)与mRNA的结合而影响mRNA的稳定性。 miRNA和siRNA则可通过引导RISC与靶mRNA的结合而促进其降解。 四、 lncRNA结合mRNA而促进翻译 lncRNA对翻译影响并不只是抑制作用。有些lncRNA对翻译具有促进作用，可通过影响核糖体与mRNA相互作用或阻止miRNA抑制作用而促进翻译。 五、 miRNA前体可竞争结合阻遏蛋白而促进翻译起始 虽然绝大部分miRNA作用是对翻译产生负调控作用，有少数miRNA却可以通过独特的机制促进翻译。 其中一种机制是pre-miRNA通过结合翻译阻遏蛋白而解除阻遏蛋白对相应mRNA翻译的抑制作用。 六、 lncRNA吸收miRNA而促进翻译 一些lncRNA也存在与miRNA互补的序列，lncRNA能够竞争性结合miRNA，与miRISC结合，使miRISC不能抑制相应靶mRNA。 lncRNA与miRNA的结合也可加速miRNA的降解。 siRNA与miRNA相同点 ?1.长度及特征：都约在22nt左右，5’端是磷酸基，3‘端是羟基； 2.合成的底物：miRNA和siRNA合成都是由双链RNA或RNA前体形成； 3.Dicer酶：依赖Dicer酶的加工； 4.作用方式：都可以阻遏靶标基因的翻译，也可以导致mRNA降解，即在转录水平后和翻译水平起作用。 ? 不同点 siRNA miRNA 产生机制 外源引起的，如病毒感染和人工插入dsRNA之后诱导而产生， 是生物体自身的一套正常的调控机制 直接来源 长链dsRNA 发夹状pre-miRNA 分子结构 siRNA是双链RNA miRNA是单链RNA 生物合成 由dsDNA在Dicer酶切割下产生;发生在细胞质中 核内由Drosha酶处理带有茎环结构pre-miRNAs；转运到核外由Dicer酶处理，成为成熟miRNAs；发生在细胞核和细胞质中 对RNA的影响 降解目标mRNA；影响mRNA的稳定性 在RNA代谢各个层面调控；与mRNA的稳定性无关 作用位置 可作用于mRNA的任何部位 主要作用于靶标基因3′-UTR区 生物学意义 沉默过表达mRNA（RNAi）；抑制病毒感染 miRNA主要在发育过程中起作用，调节内源基因表达 第八部分非编码RNA与基因表达及其调控 高 颖 大连医科