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荧光染料的选择及数据分析 张新梅 From BD Biosciences 荧光染料的选择 什么是流式细胞仪 在流动的状态中检测颗粒性物质各种物理及生物特征的一种仪器； 流式细胞仪原理 检测信号 散射光信号 前向散射光信号(FSC) 侧向散射光信号(SSC) 荧光信号 流式细胞仪原理 散射光信号 当颗粒通过聚集的激光束时，激光向各个方向散射。与激光束方向同轴的称前向角散射光信号（FSC）。与激光束垂直的称为侧向角散色光信号（SSC）。 流式细胞仪原理 前向角散射光信号（FSC） FSC反映细胞大小，一般来说，细胞越大，前向角散射光信号越强； FSC信号与细胞的折射率有关； 可用于表示细胞的凋亡； 区分死/活细胞时，可用于设门； 流式细胞仪原理 侧向角散射光信号（SSC） SSC信号主要反映了细胞的内部结构，内部结构越复杂，SSC信号越强； 流式细胞仪原理 FSC和SSC信号用于检测并显示细胞的物理学特征 流式细胞仪原理 荧光信号 当荧光抗体或其他染料染色的颗粒通过激光束时，染料吸收光子跃迁到激发态，返回基态时，染料释放出能量，大部分以光的形式释放。这种发射出的光称为荧光。 流式细胞仪原理 流式细胞仪特点及检测标本 特异性强，灵敏度高，速度快，并能实现多参数分析； 可检测的样本种类多样 (1)外周血，骨髓，细针穿刺，洗脱液，实体组织，培养细胞 (2) New!血清、血浆、培