荧光显微成像技术和应用详解.pptVIP

荧光显微技术和应用 原理 普通光学显微镜 通过普通光源的照明观察标本 荧光显微镜的种类 透射式 透射荧光显微镜原理图 落射荧光显微镜原理图 荧光显微镜的主要部件 透射式 汞灯光源 激发滤色镜 暗场聚光镜 吸收滤色镜 落射式 汞灯光源 激发滤色镜 分色镜 吸收滤色镜 分色镜 反射激发光，透过荧光 暗场聚光镜 来自下面光源的光线经过暗场聚光镜，形成了横过显微镜视野而不进入物镜的强烈光束。因此视野是暗的 荧光图像的记录方法 荧光显微镜所看到的荧光图像具有： 形态学特征和荧光的颜色、亮度 判断结果时，必须将二者结合起来综合判断 记录结果：主观指标（即工作者目力观察） 客观指标（细胞分光光度计、图像分析仪等） 荧光显微镜应用技术 1. 对细胞结构或组分的定性位、半定量研究 免疫荧光技术 用荧光标记的抗体或抗原与样品 细胞、组织或分离的物质等 中相应的抗原或抗体结合，以适当检测荧光的技术对其进行分析的方法。将抗原或抗体与荧光染料连接，用于检测相应特异性的抗体或抗原的方法称“直接免疫荧光技 directimmunofluorescent technique ”。用荧光染料标记的第二、第三抗体等检测相应抗原抗体复合体的方法则称“间接免疫荧光技术 indirect immunofluorescent technique ”。 由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出，从而可