反向遗传学及其相关技术详解.pptVIP

2002年5月，Lindenbach(美),双链RNA→艾滋病病毒细胞→减少艾滋病病毒基因表达90%以上。 2002年7月,Novina等用RNAi技术实现了HIV1病毒的阻抑。 2002年7月, McCaffrey(美)等人, 双链RNA+肝炎Ｃ病毒-标志基因→鼠肝脏→抑制标志基因的表达/肝炎Ｃ病毒基因的表达。 利用RNAi可以直接和有效地起到抗病毒的作用。 共抑制、基因压制和RNAi→dsRNA→降解靶mRNA→抑制靶基因的表达。均属于PTGS！ dsRNA导入线虫→RNAi ；dsRNA注射线虫体腔→RNAi ；dsRNA浸润线虫/dsRNA的工程菌喂养线虫→RNAi。 dsRNA导入植物→RNAi；同样，dsRNA注射植物韧皮部→RNAi；吸附500bp基因片段的金属片插入植物→侵入点组织发生RNAi。 RNAi普遍存在于各种生物中,具有抗病毒、稳定转座子及监控异常表达mRNA的生物学功能。 增强子陷阱( enhancer trap )：转座子含有一个具弱小启动子驱动的报告基因。报告基因的表达只有在转座发生在内源增强子附近时才能获得。 启动子陷阱(promoter trap)：转座子带有一个无启动子的报告基因，这个基因只有在转座子插入一个植物活跃的内源启动子下游时才能表达。 修饰的方法-增强子陷阱与启动子陷阱 Mu转座子系统 转座子打靶载体是以两种噬菌体Mu为基础的mi