生命科學實驗(三)-植物組織培養.pptVIP

植物組織培養 豬籠草 密閉空間! 組培原理 植物細胞具有 ”分化全能性” 再生能力 分化全能性（totipotency） 細胞細胞核具有完整基因組，給予適當誘導條件（如荷爾蒙濃度、比例)，使具有再生為新個體之能力，稱之。 組培定義 將植物體之一部份與母體分離，在適當條件之 無菌狀態下加以培養，使其繁殖之一種技術。 消毒 初步修飾 消毒 修飾 接種 完整 植株 清洗 無菌培養之建立 消毒 初代培養 繼代培養 組織培養流程 Plant Tissue Culture--- 材料部位及目的 植物體培養或全體培養 胚培養 器官培養 組織培養或癒傷組織培養 細胞培養 培養條件 培養條件 供給的養分---培養基 Murashige＆Skoog（1962）開發完整人工培養基 - MS medium 培養的環境 培養基主要成分： 1.無機鹽類 2.碳源 3.維生素 4.生長調節劑 5.有機添加物 6.水 7.洋菜粉 培養基主要成分 1.無機鹽類 包括氮、磷、鉀…等大量元素及微量元素（I,B,Mn,Zn,Mo,Cu及Co），可用花寶1號或2號（3克/升）來取代。 2.碳源 蔗糖、葡萄糖。 濃度為2﹪~4﹪；20克/升~40克/升。 一般培養利用台糖食用糖即可。 3.維生素 （Vitamins） Thiamine(維他命B1)為必需，另添加Pyridoxine(維他命B6)，Nicotinic acid(菸鹼酸)，myo-inositol(肌醇)可促進細胞生長。 4.生長調節劑 NAA，2.4-D(10-7~5×10-5M) Kinetin，BA(10-7~10-5M) 5.有機添加物 酵母抽出物、麥芽抽出物、椰子汁、果汁(蕃茄、香蕉、蘋果)或馬鈴薯。 6.水 蒸餾水最佳 7.洋菜粉 8~10克/升 培養基配置---MS 培養條件 供給的養分---培養基 培養的環境 培養環境 溫度：低於15℃生長緩慢，25℃最適，避免超過35℃ 光照：每日12～16小時光照 光度：一般日光燈亦可 濕度：除濕機 滅菌及無菌操作 移植材料以化學藥品消毒 培養基，培養器皿及解剖工具以高壓滅菌釜消毒（121℃、1.1 Kg/cm2，20～40分鐘） 移植操作空間：無菌操作台或無菌室 組織培養的應用 生產無病毒的種苗 迅速的繁殖種苗 優良品種的保存 生理學、遺傳學、藥學、園藝學等等的應用 生理學上之應用： 利用組織培養方法研究 植物生理代謝過程有下列好處： 無菌 實驗材料單純 物質吸收快速 無季節性限制 馴化 V.S健化 健化：強光、高糖或低濃度無機鹽類 (出瓶前) 馴化：弱光，緩慢使植株適應外界濕度 (出瓶後) 消毒 ENDING 人工環境 * 1.分化全能性~~~啥米叫分化 2.型態雙極性~~~~為了維持完整生存個體能夠自動形成缺失器官之能力EX:根生莖(地瓜)、莖生根(黃金葛) 1+2 ~~~~一棵植株 * 好處跟壞處~ 木本植物 價位高植物~ * Cycle 大量繁殖與母本一樣的植株 * 大量元素微量元素 光合作用少 合成慢 錦上添花 * Murashige＆Skoog（1962）開發完整人工培養基（synthetic medium） * 冷氣一機二用 光 / 暗週期為14 / 10 小時 * 滅菌釜 無菌操作台 * 人工環境 * 1.分化全能性~~~啥米叫分化 2.型態雙極性~~~~為了維持完整生存個體能夠自動形成缺失器官之能力EX:根生莖(地瓜)、莖生根(黃金葛) 1+2 ~~~~一棵植株 * 好處跟壞處~ 木本植物 價位高植物~ * Cycle 大量繁殖與母本一樣的植株 * 大量元素微量元素 光合作用少 合成慢 錦上添花 * Murashige＆Skoog（1962）開發完整人工培養基（synthetic medium） * 冷氣一機二用 光 / 暗週期為14 / 10 小時 * 滅菌釜 無菌操作台 *