蛋白芯片：蛋白表和抗体筛选的有力工具.docVIP

蛋白芯片：蛋白表达和抗体筛选的有力工具 Angelika Lueking, Martin Horn, Holger Eickhoff, Konrad Bussow, Hans Lehrach, and Gerald Walter 中华基因网译 摘要：基因组序列的信息是由蛋白表达才行使其功能的，进而使生命能够正常进行。我们研究和发展了一个在cDNA微矩阵上进行基因表达谱研究的一种辅助的方法，这种技术能够在芯片大小的蛋白微矩阵上进行大量的基因表达和抗体筛选。这种技术应用一种带有一种新的转移图章的机械手进行点样，蛋白溶液被高密度的点在聚偏二乙烯二氟（PVDF）膜上。在此膜上能够高灵敏度的检测出经纯化的特殊蛋白。在该试验中，用92个人cDNA克隆在酶标板上表达所得细菌溶胞物作为蛋白质点成芯片，在此芯片上能够可靠地进行纯化的蛋白表达物的检测。假阳性克隆和以不正确阅读框架来表达蛋白的比率低。所挑选克隆产物的特异性在相同的芯片上应用单克隆得到证实。带有一些不相关蛋白的一些抗体的交叉反应表明，用来检测抗体特异性的蛋白质芯片可以对蛋白的整个库进行检测。因为这种应用不仅仅局限在抗原-抗体体系，蛋白质芯片也能够为基因表达和受体-配体相互作用的大量检测提供一个普遍的方法。 关键词:微距阵;机械人技术;蛋白质;基因;表达；抗体；筛选 尽管整个人类基因的40-80%现在已经以表达序列标签（EST）的形