专题2第2节第二课时动物细胞融合与单克隆抗体(共20张PPT).ppt

1970年，有两位科学家做了一个人—鼠细胞融合的实验，以证明细胞膜上的蛋白质分子是运动的。那么，如何实现人—鼠细胞的融合，以及动物细胞融合后还有什么用途呢？ 学习目标二：单克隆抗体 学习目标二：单克隆抗体 P55：1、植物体细胞杂交技术与动物细胞 融合技术有什么不同？ 植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术基本相同，不同的是植物体细胞融合前需去掉细胞壁，然后再融合；动物细胞融合是两个体细胞直接融合。 * 两个细胞正在融合 受精作用 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 学习目标一：动物细胞融合（细胞杂交） 1、概念： 2、结果： 形成单核的杂交细胞 3、原理： 细胞膜的流动性 4、诱导方法 物理法：离心、振动、电激 化学法：聚乙二醇（PEG) 生物法：灭活的病毒（最常用） “2个或多个动物细胞” → “1”、“杂交单核细胞” 思考：为什么细胞融合过程中使用的病毒 需要灭活？不灭活行吗？ 因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，不灭活的话病毒会感染细胞，导致疾病。 灭活丧失感染性，但保留融合活性。 用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程： 细胞核 灭活病毒颗粒 细胞核 杂交单核细胞 5、过程： 动物细胞A 动物细胞B 诱导，融合 （膜、质、核融合） 1个完整的杂交细胞AB 6、意义： 成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段；为制造单克隆抗体开辟了新途径。 突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。 7、应用： 强调：效应B淋巴细胞是能够产生抗体的B淋巴细胞，下文将其简称为B淋巴细胞 抗体：能够与抗原发生特异 性结合的免疫球蛋白。 效应B细胞 (浆细胞） 记忆B细胞 B淋巴细胞 增殖分化 受抗原刺激 能产生抗体的细胞是浆细胞（即效应B细胞）。 抗体的传统生产方法: 抗原 反复注射动物 从动物的血清中分离抗体 该法制备抗体的缺点： 产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。 单克隆抗体（杂交瘤技术） 读下面一段资料，找出单克隆抗体的概念 人们发现，动物在免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。 单克隆抗体：单个B细胞克隆产生的化学性质 单一、特异性强的抗体。 资料分析 提示1：对B细胞进行细胞培养可行吗？ 提示2： 我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？ 问题：如何大量生产单克隆抗体？请尝试设计 一个方案。 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖 杂交瘤细胞 动物细胞培养技术 设计方案： 动物细胞融合技术 单克隆抗体 既能产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞 1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验 BB、B瘤、瘤瘤 （B、瘤） （一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活 获得产生相应抗体的B细胞 （二选）： 选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞 √ 体外培养 小鼠腹腔内培养 杂交瘤细胞特点：既能产生特异性抗体，又能大量增殖。 单克隆抗体制备过程 注射抗原 效应B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选，继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 思考：此过程利用的原理和技术有哪些？ 免疫原理 细胞融合技术 动物细胞培养技术 2、该方案能达到预期效果吗？为什么？ 4、图中B为________过程，常用_________作为诱导剂，该细胞继承___________的遗传特性，既能__________,又能___________。 1、该实验方案的目的是__________ 3、A是从小鼠的脾脏中取得_______,该细胞能够产生______ 5、C过程指细胞培养，该过程包括_____培养和_____培养两个阶段，其中_____代以内的的细胞属于细胞株。 制备单克隆抗体 B细胞 抗体 细胞融合 灭活病毒 双亲细胞 分泌抗体 无限增殖 原代 传代 50 B 体外培养 骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞 足够数量的细胞群 注射到 小鼠腹腔 A C 1、下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案 3、单克隆抗体的应用： 单克隆抗体的优点： 特异性强、灵敏度高、可大量制备 ②应用于 运载药物：制成“生物导弹” 治疗疾病：主要用于癌症治疗 既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量。 ①作为诊断试剂（最广泛的用途） ： 准确识别各种抗原物质，并特异性结合 优点： 准确、高效、简易、快速 “生