在体小肠吸收实验.docVIP

实验报告 课程名称：_______________________________指导老师：________________成绩：__________________ 实验名称：_______________________________实验类型：________________同组学生姓名：__________ 一、实验目的和要求（必填） 二、实验内容和原理（必填） 三、主要仪器设备（必填） 四、操作方法和实验步骤 五、实验数据记录和处理 六、实验结果与分析（必填） 七、讨论、心得 一、实验目的 1、掌握大鼠在体肠管泵循环法研究吸收的试验方法。 2、掌握药物肠管吸收的机理和计算吸收速度常数（ka）和吸收半衰期t1/2 二、实验原理 1、研究药物消化管吸收试验方法：体外试验法、在体试验法和体内试验法。 2、消化管吸收药物主要方式是被动扩散。 这种形式的吸收不消耗能量，其透过速度与膜两侧的浓度差成正比，可用下式表示： -dQ/dt DKS C-Cb /h（1） -dQ/dt PSC/h k’C（2） dQ/ dt D ：药物在膜内的扩散系数 k ：药物在膜/水溶液中的分散系数 C ：消化管内药物浓度 Cb ：血液中的药物浓度 h ：膜的厚度 式（2）说明药物透过速度属于表观一级速度过程：以消化液中药物量的变化率dx/dt表示透过速度，则： -dX/dt KaX lnX lnX0-Kat lnX对取样时间t作图，可得一直线，从直线的斜率可求得吸收速度常数ka，其吸收半衰期t1/2为： t1/2 ＝ 0.693/Ka 小肠在吸收过程中，不仅吸收药物，也吸收水分，导致供试液体积减少，故不能用直接测定药物浓度的方法计算剩余的药量。酚红不被小肠吸收，因此向供试液中加入定量的酚红，在一定间隔时间测定酚红的浓度，就可以计算出不同时间供试液的体积，再根据测定的药物浓度，就可以得出不同时间小肠中剩余的药量或被吸收的药量。 三、实验仪器及试剂 仪器：蠕动泵 试剂：供试液（SD浓度：20ug/ml、ug/ml）、ug/ml）、20%NaNO2溶液、1mol/L盐酸、0.2mol/L NaOH、0.5%氨基磺酸铵 NH2SO3NH4 溶液、0.1%萘乙二胺溶液 四、实验步骤 1、（1） （2）供试液的准备：量取75-80ml供试液加入循环装置的烧瓶中，置恒温水浴中预热至37±0.5℃。 （3）生理盐水的准备：取生理盐水适量，预热至37℃备用。 （4）蠕动泵流速的调节：调节流速为5ml/min和2.5ml/min。 （5）大鼠麻醉：取大鼠一只称重，按1.1g/kg体重腹腔注射乌拉坦（浓度为20%）麻醉，并固定于固定台上。 （6）小肠两端插管；沿大鼠腹部中线打开腹腔（约3cm），在12指肠上部和回肠下部各切一小口，插入直径为0.3cm的玻璃管，并用线扎紧。 （7） （8）作成回路：将肠管两端的玻璃管按图所示与胶管连接，作成回路，开动蠕动泵，其流速为5ml/min。 （9）取样：以5ml/min流速循环10min后，将流速调节为2.5ml/min时，立即自供试液烧瓶中取样两份（1ml和0.5ml各一份），分别作为SD和酚红零时间样品，另向烧瓶中补加酚红液2ml，其后每隔15min亦按同法取样及补加酚红液，共取样9次，停止循环。 2、SD的测定 取样品1ml置10ml带塞试管中 加入1mol/LHCl 5ml，摇匀， 加0.1% NaNO2 1ml，摇匀，放置3min 加0.5% NH2SO3NH4 1ml，摇匀，放置3min 再加0.1%萘乙二胺2ml，摇匀，放置20min。在550nm的波长处测定吸收度。 比色空白液:取酚红液1ml代替样品，其余操作与样品处理一致。 3、 取样品0.5ml置10ml带塞试管中，加0.2mol/L NaOH 5ml，摇匀，在555nm的波长处测定吸收度。 比色空白液：0.2mol/LNaOH 五、实验数据记录和处理 1、 SD ：y 0.0210x-0.0332 R2 0.9981 酚红：y 0.0153x+0.0082 R2 0.9973 2、SD 计算结果如下表： 表 1 大鼠在体小肠吸收量的计算 取样时间（h） SD 酚红 供试液体积ml 剩余药量X（ug） lnX abs 浓度ug/ml abs 浓度ug/ml 循环前 20 20 75 1500 7.313 0 0.387 20.010 0.326 20.771 72.22 1444.992 7.276 0.25 0.380 19.676 0.354 22.601 66.76 1343.579 7.203 0.5 0.366 19.010 0.359 22.928 66.07