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病毒检验基本技术
第五章 病毒检验基本技术
一、标本的采集、处理与运送
一、标本采集：采集时间为病程初期或急性期；
二、标本的处理：应进行预处理
三、标本的运送：
1、病毒抵抗力弱，室温会很快灭活，应立即送实验室
2、不能立即检测，放入冻存液并加甘油或二甲亚砜（DMSO），并防止反复冻融
二、病毒的培养条件
培养工具：实验动物、鸡胚、体外培养的器官和细胞
一、组织培养
病毒在细胞内的增殖及对细胞的作用，可以根据细胞病变、细胞培养物内出现血凝素或其他病毒抗原、红细胞吸附现象及对细胞的作用及通过对“指示病毒”的感染等法加以判断。
1、培养的玻璃器皿的要求：用硫酸和重铬酸钾溶液浸泡清洗后使用
2、组织培养的营养液：
成分：氨基酸、糖类、无机盐、维生素、辅助因子等
常用的人工综合营养液：MEM、RPMI1640。
如用人工综合营养液配制细胞生长液要加如下物质：
①、血清（适量）、谷氨酰胺溶液：
动物血清含有细胞生长的各种营养因子，促进细胞贴壁和生长，具有很强的酸碱缓冲能力
②、规定量的抗生素：防止细菌污染
③、NaHCO3修正PH
④、HEPES溶液（根据情况加入））
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