教育文件分子生物学大实验生科专业学时.pptVIP

07级生物科学专业 2009.8 分子生物学大实验 课程特点 时间长，集中，强度较大； 操作要求高，涉及的基本操作技能技巧较多； 实验中将接触一些有毒试剂（如E.B.和氯仿）。 课程要求 掌握实验原理，实践、熟悉并规范分子生物学主要的技术操作，学习药品及培养基配制方法。 实验前充分做好预习和各种准备，熟悉实验指导中的实验操作过程，准备一个实验记录本； 穿实验服，实验操作认真仔细，小心有毒药品的使用； 组内做好安排和协调，相互协作，互相谦让； 遵守时间，遵守纪律，不在实验室内大声喧哗，不做与实验无关的事情。 分子生物学主要技术 DNA、RNA的提取 质粒DNA的提取 感受态细胞的制备及质粒DNA重组、转化和筛选 DNA酶切 PCR 核酸及蛋白质杂交 1、质粒DNA的提取及其酶切检测 质粒DNA提取技术（碱裂解法） 限制性内切酶酶切技术 电泳技术（琼脂糖凝胶电泳） 2、聚合酶链式反应（PCR） 反应体系的构建 反应程序的设计 扩增产物的琼脂糖凝胶电泳检测 实验内容 质粒DNA的提取及其酶切检测 质粒(plasmid)是存在于细菌染色体外的小的共价、闭环双链DNA分子，能自主复制，并在细胞分裂时遗传给子代细胞。质粒可赋予宿主细胞一些遗传性状如抗药性等，通过质粒赋予细菌的表型可识别质粒的存在，这是筛选重组转化子的基础。 质粒复制和转录或多或少依赖于宿主编码的酶和蛋白质。 质粒分为严