教育文件生物化学经典实验——糖的定量测定.pptVIP

实验一 糖类的定量测定——3，5-二硝基水杨酸比色定糖法 还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖，其中乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。 利用糖的溶解度不同，可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来，对没有还原性的双糖和多糖，可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量（还原糖以葡萄糖含量计）。 3,5-二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物： 在一定范围内，棕红色物质颜色的深浅程度与还原糖的量成正比。因此，我们可以利用比色法测定样品中还原糖以及总糖的含量。 该法是半微量定糖法，操作简便、快速，杂质干扰较少。 三、实验操作 1、样品总糖的水解及提取 准确称取山芋粉1克，放入大试管中，加入10ml 6N HCl和15ml蒸馏水，混匀。在沸水浴加热30min后，用KI-I2溶液检查水解程度。 完全水解后, 冷却并加入酚酞试剂一滴, 以10% NaOH中和至溶液呈微红色, 先用双层纱布过滤, 再用滤纸过滤并定容至100ml。精确吸取上述溶液10ml放入100ml容量瓶、稀释至刻度, 备用。 2、制作葡萄糖标准曲线 2、制作葡萄糖标准曲线 将以