UREA项目操作手册.docVIP

SOP标准操作程序 UREA 尿素（货号：OSR6134，OSR6234） 目的：规范尿素测定的操作程序，确保尿素测定的结果准确 适用范围：在Beckman Coulter AU分析仪上定量测定人血清中的尿素（UREA） 临床意义 尿素在肝脏中合成，它是蛋白质和氨基酸代谢的最终产物。因此，尿素合成取决于每日的蛋白质摄入量和内源性蛋白质代谢。在这些代谢过程中产生的绝大多数尿素通过肾小球过滤消除，40 – 60% 扩散返回血液中（与近端小管中的流速无关）。远侧小管内的重新扩散取决于尿流，受抗利尿激素调节。在利尿期间，最少量的尿素重新扩散进入血液，大量尿素被排泄到尿液中，血浆尿素浓度很低。在抗利尿（在少尿性心力衰竭，缺水状态或口渴中，可能出现这种状况）期间，尿素重新扩散到小管内的速度增加，血浆尿素增加。在肾前性和肾后性肾衰竭中，小管尿流减少，导致远侧小管中的尿素重新扩散增加，肌酐分泌增加。在心脏代偿失调、蛋白质分解代谢增加和缺水时，尿素会发生肾前性增加。尿素水平可能因肾脏因素而升高，例如急性肾小球肾炎，慢性肾炎，多囊肾，肾小管坏死和肾硬化。尿素的肾后性升高可能由泌尿道梗阻引起。血浆尿素浓度取决于肾灌注、尿素合成速度和肾小球滤过率 GFR ，在急性肾功能衰竭，慢性肾衰竭和肾前性氮质血症中，可能会升高。在透析患者中，尿素浓度代表蛋白质的降解，也是代谢状态的指标。在肾衰竭终末期，尿毒素病征（特别是与胃肠系统有关的尿毒素病征）与尿素浓度有密切的相关性。在肾功能的鉴别诊断中，血清尿素和血清肌酐通常会一起测定。 方法原理 在水和尿素酶存在的情况下，尿素被水解，产生氨和二氧化碳。在谷氨酸脱氢酶 GLDH 存在的情况下，上一反应中产生的氨与 2-酮戊二酸和NADH 结合，产生谷氨酸盐和 NAD+。单位时间 NADH 吸光度的降低与尿素浓度成正比。 反应原理 分析参数： 样本体积 2ul 吐水量 0ul R1体积 40ul 吐水量 30ul R2体积 40ul 吐水量 10ul 波长 340/660 方法 RATE 反应方向 - 读点1 12/27 标本的采集与处理 受检者的准备：空腹，采集前静坐5min，如有输液，应在停止输液3min后在另一侧肢体静脉采集。 静脉采血：除非是卧床病人，一般取坐位从肘部静脉采血，使用止血带的时间不超过1min，穿刺成功后立即松开止血带。 抗凝剂：本室采用带分离胶的真空采血管，其中包含促凝剂。 标本处理：血标本应该尽快送到实验室，室温下放置20min后即可离心，可直接用分离胶管上机。分离的血清在2-25℃可保持稳定7天。 标本拒收标准 1）严重溶血、脂血 2）标本标识不明 3）采血量不足2ml 仪器与材料 仪器：Beckman Coulter AU 生化分析仪 试剂：Beckman Coulter AU专用尿素（UREA）试剂【货号OSR6134或OSR6234】 试剂准备：本试剂为即用型试剂，可以直接放在仪器上。 储藏和稳定性：在2-8℃不开封储藏时，试剂可保持稳定到声明的失效期；开封后，在分析仪上储藏时，可保持稳定30天 参与反应成分的最终浓度： Tris 缓冲液 100 mmol/L NADH ≥ 0.26 mmol/L 二磷酸四钠 10 mmol/L EDTA 2.65 mmol/L 2-氧戊二酸盐 ≥ 9.8 mmol/L 脲酶 ≥ 17.76 kU/L ADP ≥ 2.6 mmol/L GLDH ≥ 0.16 kU/L 此试剂作为体外诊断用；不要入口，吞下有害；如果溅入眼睛，请立即用大量清水冲洗，然后就医；避免接触皮肤，带上适当的手套；必须将试剂及其容器作为有害废物处理 带上适当的手套；必须将试剂及其容器作为有害废物处理。 定标品：Beckman Coulter AU 多项系统校准液 System Calibrator，货号OE66300 质控液：Beckman Coulter AU 血清质控液Control Sera，货号ODC0003和ODC0004 定标 System Calibrator，货号OE66300。定标品UA的值可溯源到国家标准与技术协会 NIST 参考物质 SRM 909b 水平 1。 详细操作步骤参见仪器操作规程 当发生下列情况时，重新定标分析：试剂批号改变或质控值显著变化；仪器提示需要定标时；对分析仪进行了重要的预防性维护，或更换了关键部件。 质控 在Beckman Coulter AU 生化分析仪上测定Control Sera，货号ODC0003和ODC0004 按照优良实验室规范（GLP）建议，在每天检验患者样本、以及在每次进行定标/空白测定时，均应检验质控品。每天测定两个水平的质控血清。本实验室获得的结果，可能与给定的均值不同，因此实验室在根据