用序列相同但甲基化水平不同的DNA为材料,比较其作为RNA聚合酶转录模板的活性,发现甲基的引入不利于模板与RNA聚合酶的结合,降低了其体外转录活性。 5-甲基胞嘧啶在DNA上并不是随机分布的,基因的5端和3’端往往富含甲基化位点,而启动区DNA分子上的甲基化密度与基因转录受抑制的程度密切相关。 DNA甲基化抑制基因转录的机理 一、核酸的一般化学组分 二、核酸的修饰组分 三、核酸及其组分的化学反应 四、核酸组分的分离鉴定 第一章 核酸化学组分的结构和性质 三、核酸及其组分的化学反应 1.水解反应 2.β-消除反应 3.肼解反应 4.与羟胺的反应 5.亲电取代反应 6.加成反应 7.脱氨反应 8.与甲基氢氧化汞的反应 9.核糖的氧化反应 (1)化学水解: N-糖苷键对碱稳定,磷酸二酯键一般也对碱稳定,但RNA分子由于核糖上有2’-羟基,在碱催化下能生成2’- 核苷酸和3’-核苷酸。 DNA一般不被碱水解。 N-糖苷键对酸不稳定,嘌呤比嘧啶的糖苷键不稳定,DNA比RNA的更不稳定。磷酸二酯键对酸也不稳定。DNA中的N-糖苷键比磷酸二酯键更不稳定,一般得到的是游离碱基,而不是脱氧单核苷酸,碱基脱落后变成多聚核糖磷酸,其磷酸二酯键因β-消除反应而断裂。 RNA中的磷酸二酯键的酸不稳定性小于嘌呤糖苷键而大于嘧啶糖苷键,所以RNA酸水解的产物一般是嘌呤碱基和嘧啶核苷酸。
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