细胞因子的检测和应用重点讲述.pptVIP

细胞因子受体检测技术 受体cDNA分析 酶免疫技术检测法 某些细胞因子受体除存在于细胞膜外，尚可分泌进入体液，称为可溶性细胞因子受体（soluble cytokine receptor）,如sIL-2R、sIL-4R和sIFN-γR。这类受体多采用ELISA法检测。 重组细胞因子与受体的交联分析 利用化学交联剂将标记的重组细胞因子与膜受体交联，细胞裂解物经PAGE电泳后作放射自显影分析，通过带型分析可确定受体的分子量及亚单位。 三种细胞因子测定方法的比较 生物学检测法：比较敏感，直接测定生物学功能，可靠，但需培养依赖性细胞株、耗时长、步骤繁，影响因素多，不易掌握。 免疫学检测法：操作较简便、快速、重复性好、尚可测定特定细胞或亚群产生细胞因子的含量，但敏感度比生物学法低10~100倍。免疫学检测法检测的是细胞因子蛋白质的抗原性，可能是无活性的变性分子或细胞因子的裂解片断 。 分子生物学检测法：只能代表基因表达情况，不能提供细胞因子的浓度及活性等资料。 生物学活性法 免疫学检测法 原理 生物学活性水平 特异性结合反应 敏感性 一般较高(受体) 一般较低(加放大系统可明显升高) 特异性 低　 高 (识别类型、亚型) (不能) (有可能) 周期 较长 短 培养条件 大 小　 指示细胞敏感性差异 大 / 指示细胞突变 可发生 / 生物学作用相同因子扰 大 小 样品中特异性或非