培训课件--链霉素的生产.pptVIP

项目二 链霉素的生产 第5组 樊倩、陈欣怡、刘雯 栾蓉、葛凡凡、杨刚 一.概述 链霉素（streptomycin）是一种氨基葡萄糖型抗生素，分子式 C21H39N7O12 。1943年美国 S.A.瓦克斯曼从链霉菌中分离得到，是继青霉素后第二个生产并用于临床的抗生素。它的抗结核杆菌的特效作用，开创了结核病治疗的新纪元。 1.链霉素简介 中文名：链霉素 英文名：streptomycin 分子式：C21H39N7O12 分子量：581.59 化学名：：2，4-二胍基-3，5，6-三羟基环己基-5-脱氧-2-O-(2-脱氧-2-甲胺基-α-L-吡喃葡萄糖基）-3-C-甲酰-β-L-来苏戊呋喃糖甙;它是由链霉胍、链霉糖、N-甲基-L-葡萄糖胺构成的糖苷。 2.结构式 3.性状 白色或类白色粉末，无臭或微臭。 4.稳定性 链霉素的水溶液比较稳定，但其易受pH和温度的影响较大。短时间加热，如在70oC加热半小时，对活性无明显影响。100oC加热10min，活性约损失一半。最稳定的pH是4.0~4.5 5.溶解度 由于链霉素分子中含很多亲水基团（羟基和胺基），故很容易容易水，而很难溶于有机溶剂中。微溶于乙醇，不溶于甲醇、氯仿和丙酮 5.作用与危害 链霉素是治疗肺结核杆菌感染的首选药物，还用于治疗革兰氏阴性菌所引起的泌尿道感染、肺结核性脑膜炎、鼠疫、肠道感染、肺炎、败血症、百日咳等。链霉素的缺点是容易产生耐药性，长期使用对第八对脑神经有毒害。 * 二.生产原理 1.种子扩大培养原理 种子扩培是发酵工程的一个组成部分，其指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养,最终获得一定数量和质量的纯种过程。其目的首先是出于接种量的需要与菌种的驯化，同时对于缩短发酵时间、保证生产水平也有帮助 2.发酵原理 链霉素是一种从灰链霉菌的培养液中提取的抗菌素，属于氨基糖甙碱性化合物，它与结核杆菌菌体核糖核酸蛋白体蛋白质结合，起到了干扰结核杆菌蛋白质合成的作用，从而杀灭或者抑制结核杆菌生长的作用。链霉素是含有链霉胍的氨基糖苷类抗生素族中的主要成员由链霉胍、链霉糖和N甲基-L-葡萄糖胺构成的糖，苷其结构式如下。链霉素中链霉糖部分的醛基被还原成伯醇基后就成为双氢链霉，它的抗菌效能和链霉素大致相同，目前临床上使用的是链霉素或双氢链霉素的硫酸盐 斜面孢子培养 将砂土管(或冷冻管)菌种接种到斜面培养基上，经培养后即得原始斜面。 斜面培养基的主要成分有葡萄糖、蛋白胨和豌豆浸汁等，其中蛋白胨和豌豆浸汁的质量对斜面孢子质量影响很大。 摇瓶种子培养 生产斜面的菌落接种到摇瓶培养基中，经过培养即得摇瓶种子。链霉素发酵经常使用：瓶种子来接种种子罐。种子质量以菌丝阶段、发酵单位、菌丝黏度或浓度、糖氮代谢、种子液色泽和无杂菌检查为指标。摇瓶种子(母瓶)可以直接接种子罐，也可以再扩大培养，用培养所得的子瓶接种。 种子罐扩大培养 种子罐培养是用来扩大种子量的。种子罐培养为1—3级，可根据发酵罐的体积大小和接种量来确定。第一级种子罐一般采用摇瓶种子接种，2—3级种子罐则是逐级转移，接种量一般都为10％左右。 发酵培养 链霉素的发酵培养基主要由葡萄糖、黄豆饼粉、硫酸铵、玉米浆、磷酸盐和碳酸钙等所组成。 3.提取原理 链霉素是一种有机碱，其盐类在中性与酸性水溶液中可解离成三价阳离子，故可用阳离子交换树脂提取。 链霉素在Ph4～7时稳定，所以链霉素的吸附只能在中性条件下进行。氢型羧酸型树脂在酸性条件下的电离度多很小，交换容量很低，只能在碱性条件下才能起交换作用，而链霉素在碱性条件下很不稳定。因此应将其转化成钠型并选择在中性条件下吸附。 三.工艺流程 种子扩培 斜面菌种 ——一级种子培养摇瓶——二级种子培养(种子罐) ——发酵 发酵 原斜面孢子—斜面孢子——摇瓶种子——小罐种子——中罐种子——大罐发酵液——提炼车间 链霉素提取 发酵液的预处理——离子交换——脱色及精制 四.操作步骤 1.培养基 斜面培养基 可溶性淀粉20g，硝酸钾1g，氯化钠0.5g，磷酸氢二钾0.5g，硫酸镁0.5g，硫酸亚镁0.01g，琼脂20g，水1000毫升，PH7.2-7.4（配置时注意，可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中） 配制：按配方称量药品，加热搅拌至琼脂完全熔化，补水至1000ml。趁热分装于18ml*180ml试管，斜面以8ml为宜。分装完毕后，塞好棉塞并将试管捆扎好。高压蒸汽灭菌：121℃灭菌20min，灭菌后趁热摆斜面。 摇瓶种子培养基 豆饼粉20g、淀粉40g、酵母膏5g、蛋