蛋白酶k实验检报告.docVIP

重组蛋白酶K质量检测报告 实验检测报告一 ：蛋白酶k消化荧光素酶 实验原理：荧光素酶在荧光素和ATP等物质存在的条件下可以发出荧光，当荧光素和ATP都过量时，发光强度与荧光素酶的活性有关，用绿邦产的ATP检测仪可测其发光度RLU，蛋白酶K消化荧光素酶后其活性降低，相应的RLU会降低，因此可以根据发光度比较蛋白酶K的活性。 实验目的：通过不同品牌的蛋白酶K消化荧光素酶，对两种蛋白酶K的活性做出比较。 实验方法：取10个1.5ml的离心管分为两组，一组为绿邦的重组蛋白酶K，另一组为Sigma公司的蛋白酶K，均加入400ul的荧光素酶，再分别向两组加入1㎎/ml的蛋白酶10ul，20 ul， 30 ul， 40 ul， 50 ul，置于室温15min后用ATP荧光检测仪测RLU，结果如下： K（RLU） SK（RLU） 10 ul 304 1216 20 ul 45 86 30 ul 29 31 40 ul 10 15 50 ul 0 10 注：不加酶K 测该荧光素酶RLU为9999 做出折线图如下： 结果分析：荧光素酶在不加蛋白酶K的情况下，用ATP检测仪测得的RLU为9999，加入绿邦的酶K后为304，加入Sigma公司的酶K为1216，同样的体积同样的荧光素酶，在其他条件都相同的情况下，绿邦的酶K消化后的RLU下降值比Sigma的大，说明绿邦产的酶K活性较好。