第11-13章_核酸通论合编.ppt

（五） 核酸的化学合成（p260，自学） 固相磷酰亚胺法合成时，末端核苷酸的3′-OH与固相载体成共价键，5′-OH被4，4′-二甲氧基三苯甲基(DMTr)保护，下一个核苷酸的5′-OH亦被DMTr保护，3′-OH上的磷酸基上有 -N(C3H7)2和-OCH3两个基团， 3′-OH因此被活化。 每延伸一个核苷酸需四步化学反应： (1) 脱三苯甲基：末端核苷酸的DMTr用三氯乙酸/二氯甲烷溶液脱去，游离出5′-OH 。 (2) 缩合：新生成的5′-OH 在四唑催化下与下一个核苷3′-磷酰亚胺单体缩合使链增长。 (3) 盖帽：有少量(小于0.5%)未缩合的5′-OH 要在甲基咪唑或二甲氨基吡啶催化下用乙酸苷乙酰化封闭，以防进一步缩合造成错误延伸。 (4) 氧化：新增核苷酸链中的磷为三价亚磷，需用碘氧化成五价磷。上述步骤循环一次，核苷酸链向5′方向延伸一个核苷酸。 * * * * * * * * * * * * * * (三) 其他RNA的高级结构 第十五章 核酸的物理化学性质和研究方法 一、核酸的水解 (一) 酸水解 糖苷键比磷酸酯键更易水解，特别是嘌呤与脱氧核糖之间的糖苷键很容易水解。 (二) 碱水解 通常用于RNA水解，DNA的碱水解比较困难。 (三) 酶水解