定性定量方法修改.docVIP

IHSS定性方法 称取过2mm筛风干土样100g加入玻璃瓶(2.5L玻璃瓶①)中, 按土水比1:1加入1mol/L的HCl(如冒泡则1:2), 放置1h, 用0.1mol/L的HCl调至最终土水比1:10. 室温摇动玻璃瓶1h, 将混合液倒入大离心管中, 低速离心, 上清液(FA1)倒入FA瓶(2.5L)中备用. 碱提步骤：用0.1mol/L的NaOH将沉淀冲到玻璃瓶中, 并调至最终土水比1:10用1mol/L的NaOH, 立即充氮气(1min)并盖严. 保持氮气条件下(盖严)摇动玻璃瓶, 1h或0.5h一次, 持续12h后静置过夜. 次日低速离心, 上清液倒入HE(HA+FA2)瓶(2.5L玻璃瓶②)中, 用6mol/L的HCl将HE瓶中液体酸化(pH=1.0). 碱提(下划线)重复3次. 重复3次后将沉淀水洗至, 50℃烘干, 提取Hu备用(Hu提取完毕). 第三次酸化后放置1216h, 用虹吸法将上清液(FA2)吸入FA瓶, 之后低速离心, 上清液为FA2(残留), 将上清液倒入FA瓶中(FA提取完毕), 沉淀为HA. 氮气条件下在大离心管中用最少量(体积)0.1mol/L的KOH溶解HA加入计算好的固体KCl, 使K+浓度为0.3mol/L(如无絮凝则需量添加), 静置1h后, 将溶液移至高速离心管 高速离心, 保留上清液, 弃掉悬浮物. 搅拌条件下用6mol/L的HCl调节上清液pH1.0, 放置1216h, 高速离心后弃掉上清液. 在高速离心管中用30ml的HCl(0.1mol/L)+HF(0.3mol/L)浸泡HA, 室温下振荡过夜后高速离心, 弃掉上清液. 酸洗(斜体)重复3次. 用水将沉淀搅拌成泥状, 之后电渗析直到蒸馏水中无Cl-(AgNO3检测), 冻干备用(HA提取完毕). 注1: 注2: 室温条件为25℃ 注3: 低速离心为r/min, 15min, 离心管为大离心管, 250ml 高速离心为11000g, 15min, 离心管为高速离心管, ml 所需药品 1、盐酸HCl : 0.1mol/L（8.3mL→1000mL）, 1mol/L, 6mol/L（500ml→1000mL） 2、氢氧化钠NaOH: 0.1mol/L, 1mol/L 3、固体KCl 4、氢氧化钾KOH : 0.1mol/L （5.6g→1000mL） 5、氢氟酸HF : 0.3mol/L （24.87 mL→1000mL） HCl(0.1mol/L)+HF(0.3mol/L)【8.3mL HCl+24.87mLHF→1000mL】 附表1 0.1M KOH=0.4L 0.1M KOH=0.5L 0.1M KOH=0.6L 0.1M KOH=0.7L 1M KOH(L) KCl(g) 1M KOH(L) KCl(g) 1M KOH(L) KCl(g) 1M KOH(L) KCl(g) 0.010 4.088 0.010 5.208 0.010 6.328 0.010 7.448 0.020 3.696 0.020 4.816 0.020 5.936 0.020 7.056 0.030 3.304 0.030 4.424 0.030 5.544 0.030 6.664 0.040 2.912 0.040 4.032 0.040 5.152 0.040 6.272 0.050 2.520 0.050 3.640 0.050 4.760 0.050 5.880 0.060 2.128 0.060 3.248 0.060 4.368 0.060 5.488 0.070 1.736 0.070 2.856 0.070 3.976 0.070 5.096 0.080 1.344 0.080 2.464 0.080 3.584 0.080 4.704 0.090 0.952 0.090 2.072 0.090 3.192 0.090 4.312 0.100 0.560 0.100 1.680 0.100 2.800 0.100 3.920 0.110 0.168 0.110 1.288 0.110 2.408 0.110 3.528 0.120 0.896 0.120 2.016 0.120 3.136 0.130 0.504 0.130 1.624 0.130 2.744 0.140 0.112 0.140 1.232 0.140 2.352 0.150 0.84