《生物化学实验》理论考查复习思考题.docVIP

《生物化学实验》总复习思考题 1. 请掌握下列生物化学实验常用仪器的正确操作使用方法，并能回答以下问题： （1）离心机使用时为什么要平衡？普通离心机与高速离心机在平衡时有什么不同要求？ （2）为什么用高速组织捣碎机进行动、植物组织捣碎时，需采用间歇式方式进行操作？ （3）用真空泵进行减压抽滤时，为什么要连接缓冲瓶？ 2. 为什么肝糖元只能从刚宰杀的动物肝脏中获取？在提取肝糖元过程中，三氯乙酸、95%乙醇各起什么作用？糖元水解产物中如果存在残留蛋白质时，用班氏试剂检测水解产物，有影响3. 以下是涉及分光光度仪结构、各部件功能的一些基础问题，请依次解答： （1）请阐述分光光度仪的主要部件及其功能紫外与可见光的波长范围用分光光度法定制标准曲线时，如何确定被测物质的吸收波长？ 紫外与可见光光电管的功能是什么？为什么说光电管是分光光度仪最脆弱和最易损的部件？ 4. Beer-Lamber定律Beer-Lamber定律Beer-Lamber定律分光光度仪用分光光度仪定制标准曲线时，需将OD值测定范围 5. 可以用来进行分析测定用的标准品应具备哪些特性？ 6. 请阐述移液管与比色皿的正确清洗方法和放置方法；阐述移液管取样与比色皿加样的正确操作方式和操作注意事项。 7. 7200型可见光分光光度仪请阐述7200型可见光分光光度仪用分光光度仪定制标准曲线时，需一对比色皿，在使用时，这比色皿之间需要进行校正吗？为什么？如何校正？“黑体” “参比”“黑体”与“参比”“黑体”与“参比”8．请阐述用分光光度法测定物质含量的基本操作步骤；请阐述“两表一图”的含义。 用微机绘制标准曲线，确定回归方程需用到三个统计学函数。请写出这三个函数的表达式。标准曲线的绘制哪要素（曲线名称、纵横坐标轴的名称及单位、正方型网格线、图例、标准曲线与实验各散点的平滑连线）？. 请完整阐述测定物质含量时，定制标准曲线的目的（请参照课堂重点讲解内容回答）？ 10. 需借助显色反应来进行标准曲线定制时，显色反应试剂与标准品用量上应注意什么关系？ 14. 通过测定样品待测液OD值，由标准曲线对应的回归方程计算待测液显色浓度时，样品待测液OD值大小应控制在什么范围内？ 15. 正确理解样品待测液显色浓度、样品待测液浓度与样品浓度三个基本概念，理解三者之间的关系。16. 请阐述蛋白质双缩脲反应的原理，双缩脲反应的应用；为什么用尿素进行双缩脲反应必需用干燥试管才能得到正确的反应结果？ 1. 请阐述茚三酮反应的反应原理及其应用。 . 请阐述蛋白质“盐析”与“中性有机溶剂沉淀蛋白质”反应原理；这两类沉淀反应有何应用？ 2. 在蛋白质不可逆沉淀反应实验中，多次涉及到蛋白质遇到沉淀剂后，沉淀不增加反而消失的现象，这一现象统称为“假溶”现象，蛋白质的“假溶”与“复溶”两者之间有什么本质上的不同？并请解释以下“假溶”现象： （1）在重金属盐沉淀蛋白质实验中，加入过量的硫酸铜或过量的乙酸铅后，沉淀消失现象？ （2）在“海伦压环”试验；解释用浓硫酸与浓盐酸进行海伦压环试验振荡后，沉淀消失现象21. 请阐述用透析试验验证蛋白质“可逆”与“不可逆沉淀反应”的原理。 2. 请阐述酸、碱、盐的存在对加热变性蛋白质沉淀反应有何影响。. 请列表从检测原理、样品测定范围、标准品使用浓度与消耗量、检测结果准确性、操作难易程度、测定方法的局限性与应用等方面，对双缩脲法与Folin酚法测定蛋白含量含量的方法进行分析归纳总结。 . 请阐述考马斯亮蓝G250染色法定制蛋白质标准曲线的原理；对比Folin酚定制蛋白质标准曲线原理和方法，列表从标准品的使用浓度，测定范围，反应灵敏度，标准品的用量，线性关系的好坏比较两种测定蛋白质方法的优、缺点。Folin酚法考马斯亮蓝G250染色法定制蛋白质标准曲线考马斯亮蓝G250. 为什么在提取唾液淀粉酶前，必需将口中的残渣用清水漱尽后，才能满足实验需要，正确提取淀粉酶？否则会对酶的什么验证实验造成不利影响？ . 请阐述酶的专一性验证实验设计原理。. 为什么淀粉的水解进行程度可以通过碘滴反应加以确定。 . 在进行激活剂与抑制剂实验中，加入NaSO4的目的与意义。指在全麻作用下，用物理降温法将患者的体温下降到一定程度，使机体代谢率降低，提高组织对缺氧及阻断血流情况下的耐受能力。在脑手术和心血管手术中有见人工冬眠疗法，就在于减轻机体的过度应激反应，使机体处于冬眠状态如类似过冬的青蛙等动物以降低代谢、减轻细胞耗氧、改善微循环，从而使细胞免遭严重损害，为其原发病的治疗争取了时间，提供了前提。2014-11-18