月季的花药离体培养案例分析.pptVIP

主要知识 （一）、被子植物的花粉发育和产生花粉植株的两条途径 （二）、月季花药离体培养的操作过程 （三）、影响花药培养的因素 知识回顾 单倍体育种的过程？ 造孢细胞 花粉粒 注意： ①二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和生殖细胞核。（精子在花粉管中形成） ②三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个营养核和两个精子。 ③两个精子和一个营养核的基因型相同。 取决：培养基中的激素种类及浓度配比 体细胞胚（胚状体）： 在组织培养过程中，某些体细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构，发育过程亦与合子胚类似，被称为体细胞胚（胚状体）。 能否成功： 1、材料的选择 2、培养基的组成 （ MS培养基+不同比例的植物生长调节激素） 1、材料的选择 ⑦为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？ 花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。 （二）材料的消毒 5、无菌水冲洗3～5次 花药的外面有花萼、花瓣保护，通常处于无菌状态 二、材料的消毒： 花蕾 （70％酒精） 大约30s （无菌水）清洗 （无菌吸水纸）吸干水分 （1％氯化汞溶液） 2～4min （无菌水） 冲洗 月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比较，二者有何不同？ 在酒精消毒前，花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗 1、花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30秒 2、无菌水清洗 3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分 4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2～4分钟 （质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液） * * 课题2 月季的花药培养 花中皇后—月季又称“月月红”，自然花期5至11月 花药离体培养（N） 单倍体植株（N） 秋水仙素处理，使染色体翻倍 植株（2N） 特点：1 明显缩短育种年限 2 后代植株都为纯合子。 正常植株（2N） 花丝 花药：囊状结构，内有很多花粉 雄蕊 一、被子植物的花粉发育 花粉 花粉粒是由花粉母细胞经过减数分裂而形成，因此，花粉粒是单倍体的生殖细胞。 被子植物花粉的发育要经历： 四分体时期、单核期和双核期等阶段。 花粉母细胞 （小孢子母细胞） 4个小孢子 减数分裂 小孢子四分体 1个小 孢子 （单细胞花粉粒） 花粉粒 （双核） 有丝分裂 单核 双核 花粉母细胞 （小孢子母细胞） 4个小孢子 减数分裂 小孢子四分体 1个小 孢子 花粉粒 （双核） 有丝分裂 单核 双核 营养细胞核 营养细胞 生殖细胞核 2个精子 花粉是单倍体的生殖细胞 小孢子母细胞 小孢子 花粉囊 花药 花粉粒（双核期） 成熟花粉 8个精子 小孢子母细胞 （ ）时期 单核（ ）期 双核期 （ ）细胞核 （ ）细胞核 （ ）细胞 （ ）细胞 （ ）个精子 （ ）分裂 （ ）分裂 单核（ ）期 （ ）分裂 减数 小孢子四分体 中 边 有丝 生殖 生殖 花粉管 营养 有丝 2 2N N N N N N N N N 1、关于被子植物花粉发育的说法，不正确的是（ ） A、花粉粒是在花药中的花粉囊里形成的 B、被子植物精子的形成是直接减数分裂的结果 C、被子植物的花粉的发育要经历四分体时期、单核期、双核期等阶段 D、花粉粒在发育过程中，核先位于细胞一侧，再移到细胞中央 BD 二、产生花粉植株的两条途径 此外，植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等 三、影响花药培养的主要因素 ①不选择单核期之前花药原因：花药质地幼嫩，容易破碎； ②不选择单核期之后花药原因：花瓣开始松动，给材料消毒带来困难； ③挑选单核期花药方法：应当选择完全未开放的花蕾，菌少，易消毒。 1、材料的选择： ⑴不同种类植物的诱导成功率不同。 ⑵同一种植物，亲本植株的生理状况对诱导成功率有直接影响。 ⑶合适的花粉发育时期：花期早期时的花药最佳。 ⑷选择最合适的花粉发育时期 ⑴不同种类植物的诱导成功率不同。 ⑵同一种植物，亲本植株的生理状况对诱导成功率有直接影响。 ⑶合适的花粉发育时期：花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株 选材是否成功是花药培养成功的关键 ②选择合适的花粉发育时期是提高诱导成功率的重要因素 因为并不是任何时期的花粉都可以经过培养产生愈伤组织或胚状体，花粉发育的过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感。 一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养的成功率最高。即：最适合花药培养的小孢子发育时期为单核靠边期 选择单核期以前的花药接种，质地幼嫩，极易破碎； 选择单核期之后的花药接种，花瓣已有