培训课件_FDA药物相互作用研究指南.pptVIP

实验中应注意： (1)受试药物的浓度应该参考临床治疗剂量的血药浓度,至少包括3个涵盖治疗窗的筛选浓度,其中至少1个浓度要超过平均预期治疗浓度1个数量级; ( 2)与肝细胞共孵育2～3 d后,通过CYP特异的探针药物(参考指南推荐)测定酶活性; (3)使用新鲜分离的或者冻存的肝细胞进行实验时,应该至少选择3份不同的供体以减少诱导实验中存在的个体差异。 评价药物酶诱导作用时,指南建议: (1)药物体外实验引起的酶活性的改变≥40%阳性对照结果时,可以认为药物具有酶诱导作用,需要进一步的体内研究; (2) EC50可以用来比较不同诱导剂诱导能 力的强弱; (3)指南认为,根据目前了解的CYP酶诱导的细胞学机制, 如果一个诱导实验显示对CYP3A4 酶没有诱导作用, 可以推断此药物对CYP2C8, CYP2C9和CYP2C19也没有诱导作用。 7. P-gp底物和抑制剂的体外实验研究 考察药物是否是P-gp的底物或抑制剂,最常见的方法有哪些？ 双向转运测定法由于更直接, 因此被作为标准的方法。 ATP酶活性测定法和摄取/外排法可以用于快速筛选,但是不能区分是底物还是抑制剂。如果药物透过性(膜扩散能力)低,ATP酶法和荧光定量法常常无法识别是否是P-gp的底物。 对高通透性化合物,双向转运测定法也不适用。 这些底物作为阳性对照，保证实验用细胞能够表达功能性的P-gp. 7.1双向转