培训课件_简化糖化血红蛋白标准化与现状.ppt

IFCC参考系统的实验室间比较 经实验室间的循环比较： －说明参考系统实用性强、精密度好。 －实验室内的CV为0.5％～2％； －实验室间的CV为1.4％～2.3％。 Roche的HbA1c 所有罗氏的HbA1c产品的检测结果，均实现了标准化；可直接溯源至IFCC参考系统 IFCC结果与其他系统值的转换 罗氏系统的IFCC-HbA1c结果可转换为各个国家标准化方法确定的值。例如：美国的DCCT/NGSP值、日本糖尿病学会的JDS值等。 IFCC方法的初步参考范围 对120个健康人（年龄35～55岁）的全血检测，为3.33％±0.48％（均值±2 SD），无性别差异。 如预期预料的一致，IFCC参考范围低于其他的常规方法，如：DCCT/NGSP值的范围。 IFCC-HbA1c临床应用判断限 初步判断限为： －3％～4％为无糖尿病； －5％为糖尿病控制良好的目标； －＞ 6％为需要调整治疗方案。 IFCC-HbA1c IFCC标准化方法的参考范围较低，是因为IFCC参考方法具有较好的特异性。 罗氏免疫方法也具有较低的参考范围，因为方法对HbA1c检测的特异性，以及按照IFCC参考方法标准化。 HbA1c检测的历史回顾 现有的DCCT/NGSP标准化是基于非特异的离子交换层析的HPLC方法。 该方法仅依据修饰与未修饰的血红蛋白分子电荷的差异，来区分糖化与非糖化的血红蛋白。 这样的差异可以发生于缬氨酸a-氨基上的多个化学反应（如：氨基甲酰化、乙酰化、以及糖化作用）。 DCCT/NGSP标准化方法 在HPLC的“HbA1c”峰中，不仅有HbA1c，还有表现为相同电荷数的其他修饰血红蛋白。所以，该方法对HbA1c的估计偏高。 现今测定HbA1c的常规HPLC方法（如：Bio-Rad Variantt、TOSOH）有了很大的改善，几乎完全解决了特异性的问题。 但是，DCCT的标准化方法依然如旧，使NGSP的结果仍然是老方法的，存在着特异性差的问题。 ＞ DCCT/NGSP标准化方法 DCCT标准化方法的分离图谱 分离图谱的问题 注意：层析的分离峰没有完整的底线。这就是为什么历史上DCCT/NGSP的HbA1c结果偏高的原因。 对Hb A的层析分析证实，有一些较少的血红蛋白，被称为Hb A1a、Hb A1b、和Hb A1c，这些合称为Hb A1、快速血红蛋白（因为在电泳的电场中泳动快于Hb A）、糖化血红蛋白（Glycohemoglobins、或glycated hemoglobin）。国际纯化学与应用化学的生物化学命名委员会推荐的名词为：neoglycoprotein；以glycation来描述这个过程。 NGSP与IFCC计划的主要特征 1996年建立了美国国家糖化血红蛋白标准化计划（NGSP）。 1995年，国际临床化学学会（IFCC）成立HbA1C标准化工作组。 NGSP IFCC 组成 NGSP与IFCC计划的主要特征 使糖化血红蛋白检测结果标准化，要求各实验室的检测结果与DCCT参考实验室具有可比性。DCCT的报告中已明确了GHB与血糖平均水平和糖尿病并发症发展的危险关系。 开发了使所有检测HbA1C的常规方法进行国际标准化的参考检测系统，有参考物质与参考方法。可以实现溯源性。但是，临床应用价值必须详细说明IFCC值与DCCT值的关系。 NGSP IFCC 任务 NGSP与IFCC计划的主要特征 HbA1c是根据指定的比较方法检测的层析图中的选定峰值定义的。指定的检测方法与DCCT参考实验室方法一致，为HPLC方法，采用Bio-Rax 70树脂?分离层析。 HbA1C是根据非糖化与糖化血红蛋白的分子结构，建立HbA1C与HbAo参考物为标准、以确认的参考方法，经对样品的红细胞分离、溶血、酶解血红蛋白、用HPLC-ESI/MS或HPLC-CE方法检测。 NGSP IFCC 原理 NGSP与IFCC计划的主要特征 由DCCT参考实验室对新鲜全血样品检测，形成冰冻全血。分发给厂商，校准厂商结果。 直接具有HbA1C与HbAo纯物质。用配制方法形成参考方法标准。经参考实验室与厂商间对新鲜全血检测的比对符合要求后，由厂商实验室确定校准品的定值。 NGSP IFCC 校准 NGSP与IFCC计划的主要特征 NGSP网络包括一个一级参考实验室、一个候补的参考实验室、遍布全美和欧洲的二级参考实验室。二级参考实验室的检测方法有：离子交换HPLC、亲和HPLC、毛细管电泳、和免疫测定。这些实验室必须定期接受一级参考实验室下发的全血标本被监视。 IFCC网络用于IFCC参考系统与各厂商、EQAS等提供服务。网络由6～18个参考实验室组成。 网络实验室每年参加两次实验室间比较，依据网络的