基因突变与体细胞变异绪论.ppt

1.植物体细胞变异定义 体细胞无性系变异：是指植物外植体经组织、细胞培养的脱分化和再分化过程，表现于再生植株中的变异。 已经观察到体细胞无性系变异的农作物有甘蔗、香蕉、马铃薯、小麦、水稻、水晶掌等上百种。 ＊自然界生物突变现象 ＊自然界生物突变现象 ＊自然界生物突变现象 ＊自然界生物突变现象 1.1离体变异特点 普遍性： 是植物组织培养过程中的普遍现象，不限于某些植物，也不限于某些器官，变异所涉及的性状也相当广泛。 植物组织培养可导致产生体细胞无性系变异，而且某些变异能够遗传下去。 局限性： 从表型上看，体细胞变异主要是植株形态（株高、叶形、叶色等）、生长势、育性、某些抗性等性状的变异。 从生理生化特性上看，容易出现同功酶谱、次生代谢的消长等变异。 嵌合性：指同一有机体中同时存在有遗传组成不同的细胞。 必须分离培养才能纯化。 离体再生植株的表型变异频率 离体培养变异的影响因素 供体植物 遗传背景 倍性水平，二倍体比单倍体稳定 基因型 生理状态 来源于茎尖的愈伤组织的DNA含量及染色体数的稳定性好于来源于薄壁细胞的 继代培养的次数 培养基及培养方式 1.2 来 源 自发无性系变异 诱导无性系变异 培养基的选择：MS培养基或B5培养基，做一些定性或者定量的变动。激素的作用。 外植体的选择：突变的频率不同(分化程度较高变异少)。 1.2 来源 诱变培养：筛选符合目的要求的突变体 诱变因素主要有两类: 物理诱变：各种射线； 化学诱变：甲基磺酸乙酯(MMS)，乙基磺酸乙酯(EMS) 激素 它们在育种上都有着重要意义。 物理诱变 物理诱变因素：紫外线、ｘ射线、γ射线、α射线、β射线、中子、质子等. 物理诱变的处理方法：外照射、内照射、重复照 化学诱变 化学诱变因素： 碱基类似物：如5-溴脱氧尿嘧啶是T的类似物；2-氨基嘌呤是嘌呤的类似物。 烷化剂：使碱基烷化，导致碱基错配。EMS，MMS。 化学诱变 能结合到DNA中的化合物 ：引起ＤＮＡ分子遗传密码的阅读顺序发生改变。 主要方法：浸渍法、滴液法、注射法、涂抹法、施入法和熏蒸法等。 1.3 遗传学基础 具体表现在 ： 染色体数目和结构变异； 基因突变； 碱基修饰（表观遗传变异）； 基因扩增或丢失（转座效应）； 基因重排（转座效应） ； 转座子的激活； 影响体细胞无性系变异的因素 植物的繁殖世代及品种差异 外植体来源 愈伤组织继代次数 培养基成分：激素 培养过程中理化因素 植株再生方式 遗传变异检测方法 染色体计数 同工酶 蛋白质电泳 分子标记（AFLP,SSR, ISSR, RAPD, SSAP etc） 2.3.2.3. Recombinative—Repair 是一种复制后修复，必须依赖重组的过程，原DNA损伤可能永远存在于子代细胞并遗传下去，也可能被其他机制修复。 当复制进行到损伤处时，发生短时间的停顿，然后越过损伤处，又以一种未知的机制起始DNA复制，这样在子链上就会产生一个缺口。 另一条DNA互补链则正常完成复制形成双链。 2.3.2.3. Recombinative—Repair 两条新链间发生重组，带有缺口的子链以正常互补母链为模板完成修复，而带损伤的母链则与一条正常的子链配对。 经若干代后，即使母链上的DNA损伤仍存在，在后代中所占比例也越来越少，对表型的影响也越来越小，就好像已经修复正常。 3.1 转座子的概念 是染色体上的一段DNA序列，它作为一个可以分离但不交换的单元，能从一个位点转移到另一个位点。 两端具有重复序列，中间有转位酶基因等序列；转位通过转座子两端的DNA序列和宿主DNA的一段序列发生重组而实现的。 转座子复制或不复制。 生物突变的主要来源。 3.2. 转座子类别 自主因子（autonomous elements）：带有一对终端IR序列和一个转座酶基因的DNA转座子，具备了催化自身转化的所有条件。 非自主因子（nonautonomous elements）：仅有IR，是前者缺失所造成，这种缺失导致转座酶的（transposase）缺乏。 反转录转座子 剪切转位 可以直接从染色体的一个位点转移到另一个位点。 特点：两端有约20nt的IR，特异的转位酶附着于此而使转座子切离下来，整合到另一个染色体上。 切离后留下的缺口被衔接，序列变动而产生突变。Tn5, Tn7, Tn10. 反转录转位（Ty1, Ty3） 酵母的Ty1因子（Ty1 element）。 1）转录成5,000 nt的RNA； 2）该转录本编码反转录酶，合成双链DNA； 3）通过整合酶（integrase）整合到染色体。 整个过程与反转录病毒的早期感染非常相似。 复制转位 转座子不切离，而是在两端交错地产生2个nick; 在接受点上也产生距离接近的2个nick； 4个断头发生