化妝品中丙烯酰胺的检测方法.docVIP

附件1： 化妆品中丙烯酰胺的检测方法 1 范围 本方法规定了采用液相色谱-串联质谱法测定化妆品中丙烯酰胺单体（CAS：79-06-1）的方法。 本方法适用于化妆品中丙烯酰胺单体含量的测定。 2 方法提要 样品经过提取后，用液相色谱-串联质谱法测定，以多反应离子监测模式进行监测，采用特征离子丰度比进行定性，丙烯酰胺与内标峰面积比定量。本方法对丙烯酰胺的检出限为0.00005 μg，定量下限为0.0002 μg；若取0.2 g样品测定，本方法对丙烯酰胺的检出浓度为0.005 mg/kg，最低定量浓度为0.025 mg/kg。 3 试剂 除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为实验室用一级水。 3.1 丙烯酰胺，纯度 ≥ 99.0 %。 3.2 氘代丙烯酰胺（2,3,3-D3），纯度 ≥ 98 %。 3.3 醋酸铵。 3.4 乙腈，色谱纯。 3.5 甲醇，色谱纯。 3.6 空白化妆品样品：选择不含丙烯酰胺的化妆品作为空白样品。 3.7 乙腈溶液[φ（乙腈）= 10%]：量取10 mL乙腈（3.4）置100 mL量瓶中，加水稀释至刻度，混匀。 3.8 醋酸铵溶液[c（醋酸铵）= 0.02 mol/L]：称取醋酸铵0.08 g，置50 mL量瓶中，加水溶解并定容至刻度，即得浓度约为0.02 mol/L的醋酸铵溶液。 3.9 丙烯酰胺标准储备溶液[r（丙烯酰胺）= 0.5 g/L]： 称取丙烯酰胺标准品（3.1）50 mg（精确到0.1 mg）置100 mL量瓶中，加乙腈溶液（3.7）使溶解并定容至刻度，摇匀，即得质量浓度为0.5 g/L的丙烯酰胺标准储备溶液。 3.10丙烯酰胺系列标准溶液：按照表1操作，分别精密量取一定体积的丙烯酰胺标准储备溶液（3.9）置10 mL量瓶中，以乙腈溶液（3.7）稀释并定容至刻度，得不同浓度的丙烯酰胺系列标准溶液。 3.11内标工作溶液：称取氘代丙烯酰胺标准品10 mg（精确到0.1 mg）置100 mL量瓶中，加乙腈溶液（3.7）使溶解并定容至刻度，摇匀，即得质量浓度为100 μg/mL的氘代丙烯酰胺储备溶液，然后精密量取氘代丙烯酰胺储备溶液1mL置50 mL量瓶中，加乙腈溶液（3.7）使溶解并定容至刻度，摇匀，即得质量浓度为2 μg/mL的氘代丙烯酰胺内标工作溶液。 3.12 丙烯酰胺加入空白样品标准溶液：取空白化妆品样品6份，每份约0.20 g（精确至0.001 g）于5 mL塑料离心管中，分别加浓度为2 μg/mL的内标溶液50 μL，涡旋30 s，再分别加丙烯酰胺系列标准溶液50 μL，涡旋30 s；然后加0.15 mL 0.02 mol/L的醋酸铵水溶液，涡旋30 s。再加2.0 mL乙腈，涡旋60 s后，以10000 rpm离心转速10 min，取上清液，氮气吹干，残渣加2 mL色谱流动相复溶，涡旋60 s，以10000 rpm转速离心5 min，取上清液， 经0.45 μm微孔滤膜过滤后，滤液作为待测液，备用， 4 仪器 4.1 液相色谱-三重串联四极杆质谱联用仪。 4.2 分析天平：感量0.0001 g。 4.3 超声波清洗仪。 4.4 高速离心机。 4.5 精密移液器。 4.6 涡旋振荡器。 5. 分析步骤 5.1 样品预处理 称取样品0.20 g （精确至0.001 g），置5 mL塑料离心管中，加浓度为2 μg/mL的内标溶液50 μL， 涡旋30 s；然后加0.15 mL 0.02 mol/L的醋酸铵水溶液，涡旋30 s，再加2.0 mL乙腈，涡旋60 s后，以10000 rpm转速离心10 min，取上清液，氮气吹干，残渣加2 mL色谱流动相复溶，涡旋60 s，以10000 rpm转速离心5 min，经0.45 μm微孔滤膜过滤后，滤液作为待测液，备用。 5.2 液相色谱-三重串联四极杆质谱联用分析条件 5.2.1 色谱参考条件 色谱柱：Waters Atlantis T3（3.5 μm, 2.1 × 100 mm）或具有同等柱效的色谱柱； 流动相：甲醇+0.1%甲酸水溶液 = 1.5+98.5，恒度洗脱3 min； 流速：0.3 mL/min； 柱温：25 ℃； 进样量：5 μL。 5.2.2 质谱参考条件 离子源： 电喷雾离子源（ESI源）； 监测模式： 正离子监测模式； 监测离子对及相关电压参数设定见表2； 雾化气压力： 50 psi； 干燥气流速： 12 L/min； 干燥气温度： 350 ℃； 毛细管电压： 4000 V； 0 - 1 min：不进入质谱仪分析, 1 - 2.5 min：进入质谱仪分析。 5.3 定性判定 用液相色谱-串联质谱法对样品进行定性判定，如果检出的色谱峰的保留时间与标准品相一致，并且所选择的监测离子对的相对丰度比与标准样品的离子对