大鼠局灶性腦缺血脑组织的比较蛋白质组学研究.docVIP

PAGE 大鼠局灶性脑缺血脑组织的比较蛋白质组学研究 王继生1，邱宗荫* *绵阳市科委资助课题（编号：06S042-7）作者简介：王继生（1974~），男，药理学博士，研究方向：新药开发的药理学研究及蛋白质组学，Email： HYPERLINK mailto:wjs327@ * *绵阳市科委资助课题（编号：06S042-7） 作者简介：王继生（1974~），男，药理学博士，研究方向：新药开发的药理学研究及蛋白质组学，Email： HYPERLINK mailto:wjs327@ wjs327@ （1绵阳市第三人民医院 绵阳 621000；2 重庆医科大学药学院 重庆 400016） [摘要]目的 建立局灶性脑缺血模型，从蛋白质整体水平探讨脑缺血/再灌注的保护作用机制。方法 雄性、健康大鼠SD，随机分为正常组、脑缺血模型组参照Koizumi法并加以改进，建立MCAO大鼠脑缺血2h再灌注24h的模型；裂解液提取总蛋白质，以双向电泳技术进行蛋白质分离，考马斯亮蓝染色，获得双向电泳图谱，利用专门的软件筛选出差异蛋白质，用MALDI-TOF-MS获得肽指纹图谱，MS-Fit数据库进行搜索，获得有关的蛋白质信息。结果：局灶性脑缺血模型组与正常组脑组织的比较蛋白质组学研究。与模型组比较，从正常组筛选到23个差异表达蛋白斑点，其中13个低表达，10个高表达，鉴定其中6个蛋白质，发现白细胞三烯A-4水解酶、促甲状腺激素释放激素降解胞外酶等与脑缺血相关的蛋白质。结论：从蛋白质组学角度发现了一些与脑缺血相关的蛋白，有助于今后进一步研究脑缺血性损伤的保护机制。 [关键词] 脑缺血 蛋白质组学 A Comparative proteome study on focal cerebral ischemic tissue of rat brain Wang Ji-Sheng1, Qiu Zong-Yin2, Xia Yong-Peng2, Li Hui-Zhi2 (1.The third hospital of mianyang, mianyang 621000; 2 Department of Pharmacy, ChongQing University of Medical Science. ChongQing 400016) [abstract] Objective: To establish a model of focal cerebral ischemic tissue of rat brain and explore the protective mechanism of focal cerebral ischemia reperfusion in whole level of proteins. Method: Male and healthy SD rats , were classified them into normal , Model at random. Established the MCAO model with suture method by reperfusion 24h after ischemic 2h according to Koizumi，s method, extracted total proteins with Lysis buffer,separated proteins by two-dimensional electrophoresis(2-DE), stained proteins by Coomassie brilliant blue ,got the patterns ,found out differential proteins ,and obtained PMS by MALDI-TOF-MS, gained related the information of proteins by MS-Fit database.Result:.A comparative proteome study of model and normal group. Compared with model group, the normal group gained 23 differential protein spots, 13 spots expressed lowly, and 10 spots high, identified 6 protein spots，found out the relative cerebral ischemic proteins such as Leukotriene A-4 hydrolase， Thyrotropin-releasing hormone