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實验七探究影响酶活性的因素
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实验七 探究影响酶活性的因素
一、实验目的:
1.探究不同温度和PH对酶活性的影响; 2.培养实验设计能力。
二、探究温度对酶活性的影响
(一)实验原理:
1.淀粉遇碘后,形成紫蓝色的复合物。
2.淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖,麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。
注:市售a-淀粉酶的最适温度约60
(二)方法步骤:
1、取3支试管,编上号(A、B、C),然后分别注入2mL可溶性淀粉溶液;
2、另取3支试管,编上号(a、b、c),然后分别注入1mL新鲜淀粉酶溶液;
3、将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成3组,分别放入热水(约600
思考题1、不能只用不同温度处理淀粉溶液或酶溶液,这是为什么?
4、分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中,摇匀后,维持各自的温度5min;
5、在3支试管中各滴入1-2滴碘液,摇匀后观察这3支试管中溶液颜色变化并记录;
思考题2、在试管A、B、C中分别能观察到什么现象?
思考题3、通过上述实验,你能得出什么结论?
思考题4、在上述实验中,自变量是什么?无关变量是什么?
三、探究PH值对酶活性的影响
(一)实验原理:
思考题5、请依据下面所列实验操作步骤,写出该实验的实验原理。
(二)操作步骤:用表格显示实验步骤:(注意操作顺序不能错)
序号
加入试剂或处理方法
试管
1
2
3
1
注入新鲜的淀粉酶溶液
1mL
1mL
1mL
2
注入蒸馏水
1mL
/
/
3
注入氢氧化钠溶液
/
1mL
/
4
注入盐酸
/
/
1mL
5
注入可溶性淀粉溶液
2mL
2mL
2mL
6
600
7
加入斐林试剂,边加边振荡
2mL
2mL
2mL
8
水浴加热煮沸1min
9
观察3支试管中溶液颜色变化变记录
思考题6、请在上表中填入你所观察到的实验现象。
思考题7、通过上述实验,你能得出什么结论?
思考题8、在上述实验中,自变量是什么?无关变量是什么?
思考题9、探究温度对酶活性的影响实验中是否可以用斐林试剂来检验实验结果?为什么?
探究影响酶活性的因素
四、与酶有关的曲线解读
(一)表示酶高效性的曲线:1、催化剂可 化学反应速率,与无机催化剂相比,酶的催化效率更 。2、酶只能 达到化学平衡所需时间,不改变化学反应的 。3、酶只能催化 的化学反应。
(二)表示酶专一性的曲线:1、在A反应物中加入酶A,反应速率较未加酶时明显 ,说明酶A催化底物A参加反应。2、在A反应物中加入酶B,反应速率和未加酶时 ,说明酶B不催化底物A参加反应。
(三)影响酶活性的曲线:1、在一定温度范围内,随温度的升高,酶的催化作用 ,超过这一范围酶催化作用将 。2、在最适pH时,酶的催化作用最强,高于或低于最适pH,酶的催化作用都将 。3、过酸、过碱、高温都会使酶 ,而低温只是 酶的活性,酶分子结构未被破坏,温度升高可恢复活性。
4、丙图说明反应溶液pH的变化不影响酶作用的最适 。
(四)底物浓度和酶浓度对酶促反应的影响:1、在其他条件适宜、酶量一定的条件下,酶促反应速率随底物浓度增加而 ,但当底物达到一定浓度后,受 和酶活性限制,酶促反应速率不再增加(如右图甲)。2、在底物充足,其他条件适宜的条件下,酶促反应速率与酶浓度 (如右图乙)。
附:比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率
一).实验原理:
鲜肝提取液中含有过氧化氢酶,过氧化氢酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2。经计算,质量分数为3.5%的FeCl3溶液和质量分数为20%的肝脏研磨液相比,每滴FeCl3溶液中的Fe3+数,大约是每滴肝脏研磨液中过氧化氢酶分子数的25万倍。
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