復合芽孢益生菌剂的研制及应用2.docVIP

复合芽孢益生菌剂的研制及应用 查新关键词：益生菌；复合芽孢；丁酸梭状芽孢杆菌；凝结芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌；高密度发酵 研发背景 通过产生有机酸和抗菌肽等抗菌物质，抑制有害菌的生长促进乳酸菌、双歧杆菌的繁殖但受目前生产工艺等条件的影响，只有地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌等少数益生菌株在饲料中得到应用，而且市场的产品多为单一菌株的菌剂。而且不同菌株的定植时间和定植部位具有一定的差异，单一菌株制剂的应用，还存在占位效率较低，产酶酶谱窄，抑菌能力弱等问题，应用效果易受气候、环境和日粮变化等多种因素的干扰研究结果显示：地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌主要定植于小肠和盲肠，定植时间较短（一般不超过30小时），地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌而能够产生乳酸且调节肠道菌群能力较强的乳酸菌却因无法耐受高温，难以在饲料日粮中得到应用。丁酸梭状芽孢杆菌（酪酸菌）主要定植于消化道中后端的盲肠和结肠部位，可产生多种抑菌物质，有效调节后肠菌群环境，其代谢物丁酸是肠组织发育的主要动力来源，对饲料日粮的消化吸收具有较强的促进作用。凝结芽孢杆菌是目前发现的唯一可以形成芽孢的同型乳酸发酵菌株，不但具有耐热性好以及不怕胃酸和消化酶破坏等诸多优点，而且可代谢产生乳酸、抗菌肽和有机胺等抑菌物质，调节肠道菌群能力强。 酸梭状芽孢杆菌或凝结芽孢杆菌制备的人用和兽用的益生菌剂在国外已得到广泛应用，受研发条件和生产工艺的影响，国内的应用起步较晚，目前仅有个别厂家生产兽用酪酸菌制剂，饲用凝结芽孢杆菌制剂还处于研发阶段，未在国内畜牧行业进行规模应用。 目前，肉制品原料的抗生素残留，不但是影响食品安全的主要因素，还会使大量抗性细菌随动物粪便散布到土壤，滥用抗生素所引发的“超级细菌”的危害在逐渐增大，也得到国际社会的高度重视，研制高效稳定的饲用微生态菌剂，可有效防治多种畜禽消化道疾病，而且产品安全，无毒无残留，并可兽用抗生素滥用，为环境安全和人类身体健康提供保障。 本项目研究目的 通过菌种筛选，分别得到耐高温、肠道定植能力和纤维分解能力强的的地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、丁酸梭状芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌各一株，并通过高密度发酵工艺研究和复合组分配比的优化，研制高活性的复合芽孢益生菌剂。 二、研究内容和预期成果 课题的研究内容和重点解决的关键问题 1、高活性芽孢菌株的筛选：通过生化和分子鉴定、肠道定植时间测定、产酶酶系分析、体内和体外抑菌效果的检测等指标，筛选高活性地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、丁酸梭状芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌各一株。 2、应用菌株的高密度发酵研究。 3、产品组分及应用方案的优化：根据纤维降解能力、抑菌能力、动物攻毒试验和规模型养殖试验的生产指标统计，优化复合芽孢制剂的组分及在不同动物养殖中的应用方案，并通过产品对肠组织发育和IgG和sIgA等非特异性免疫指标的检测，对应用方案进行检验。 预期成果和提供方式、推广应用预测（如应用基础研究应说明其科学意义和应用前景） 目的菌株的生理特性、动物体内动力学、高密度发酵工艺，制备一种复合芽孢益生菌剂，并在此基础上加以推广。 三、研究方法和技术路线 拟采取的研究方法、步骤、技术路线其可行性、可靠性论证 四、研究工作的总体安排及年度进展 五、实现预期目标已具备的条件 1．现有研究工作基础 2．现有仪器设备 六、本研究已具备的技术力量 1. 申请人近三年所取得的成就（包括论著、论文、获奖专利情况，请注明出处、第几完成者） 2. 课题参加单位及分工 七、本研究经费预算 八、单位学术委员会审查意见（对本研究的意义、研究方案、申请课题组主要成员的素质与水平等签署具体意见） 九、其他需要说明的事项 十、有关附件 1、相关科研成果、专利等知识产权证明材料；生化和分子鉴定 肠道定植时间测定 抑菌能力 活性分析 地衣芽孢杆菌 枯草芽孢杆菌 凝结芽孢杆菌 丁酸梭状芽孢杆菌 菌种不同比例复配 纤维降解能力 抑菌能力 动物攻毒保护试验 规模养殖综合评定 新型复合微生态制剂