胡蘿卜素的提取.doc

胡萝卜素提取的设计方案 一，实验目的 1、学习柱色谱法、薄层色谱法的原理及其方法。 2、掌握从胡萝卜中分离提纯胡萝卜素的原理和方法。 3、学会用色谱法从胡萝卜中提取胡萝卜素并鉴定之。 4、初步了解胡萝卜素的来源以及生产方法。 二，实验原理： β－胡萝卜素可通过化学合成，植物提取和微生物发酵3种方法生产，根据生产方式不同分为化学合成β－胡萝卜素和天然β－胡萝卜素两大类。本实验是从胡萝卜中提取天然β－胡萝卜素。而提取的方法可选择色谱法。因为色谱法是分离、纯化和鉴定有机化合物的重要方法之一。具有极其广泛的用途。色谱法的基本原理是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能（即分配）的不同，或其他亲和作用性能的差异，使混合物的溶液流经该物质， 进行反复的吸附或分配等作用，从而将各组分开。流动的混合物溶液称为流动相，固定的物质称为固定相（可以是固体或液体）。根据组分在固定相中的作用原理不同，可分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、排阻色谱等；根据操作条件的不同，又可分为柱色谱、纸色谱、薄层色谱、气相色谱及高效液相色谱等类型。 1、柱色谱法 柱色谱（柱上层析）常用的有吸附柱色谱和分配柱色谱两类。前者常用氧化铝、硅胶作固定相。在分配柱色谱中以硅胶、硅藻土和纤维素作为支持剂，以吸收大量的液体作固定相， 而支持剂本身不起分离作用。吸附柱色谱通常在玻璃管中填入表面积很大，经过活化的多孔性或粉状固体吸附剂 。 当待分离混合物溶液流过吸附柱时，各种成分同时被吸附在柱的上端。当洗脱剂流下时，由于不同化合物吸附能力不同，往下洗脱的速度也不同，于是形成不同层次，即溶质在柱中自上而下按对吸附剂亲和力大小分别形成若干色带，再用溶剂洗脱时， 已经分开的溶质可以从柱上分别洗出收集 ； 或者将柱吸干 ， 挤出后按色带分割开 ， 再用溶剂将各色带中的溶质萃取出来。对于柱上不显色的化合物分离时，可用紫外光照射后所呈现的荧光来检查，或在用溶剂洗脱是分别收集洗脱液，逐个加以鉴定。 2、薄层色谱法 薄层色谱法（ThinLayerChomatography，缩写TLC）是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，也用于跟踪反应进程。它兼备了柱色谱和纸色谱的优点。薄层色谱是在载玻片上才、均匀铺上一薄层吸附剂，制成薄板，用毛细管将样品点在起点处，把此薄层板置于盛有展开剂的展开槽内，浸入深度为0.5cm，待展开剂前沿利顶端约1cm附近时取出，干燥后喷以显色剂，或在紫外灯下显色，测定斑点位置，计算比移值（Rf）。由于层析是在薄层上进行的，故称为薄层层析。薄层色谱常用的有吸附色谱和分配色谱两类。一般能用硅胶或活性氧化铝薄层色谱分开的物质，也能用硅胶或氧化铝柱色谱分开，凡能用硅藻土和纤维素作支持剂的分配柱色谱能分开的物质；也可分别用硅藻土和纤维素薄层色谱展开， 因此，薄层色谱常用作柱色谱的先导。同时也可以用吸收剂非极性大孔吸附树脂，具本实验的类胡萝卜素具有末端带环的长链结构，故平均孔径为290～300A的X-5大孔吸附树脂更利于他们的吸附和吸附过程中的传质。 3、胡萝卜素的分离 β-胡萝卜素分子中的碳骨架是由8个异戊二烯单位连接而成的，是四萜类化合物。它 的分子中有一个较长的π-π共轭体系，能吸收不同波长的可见光，因而，呈现一定的颜色，β-胡萝卜素是黄色物质，所以，又叫做多烯色素。β -胡萝卜素的结构式如下： 胡萝卜素是最早发现的一个多烯色素。后来，又发现了许多在结构上与胡萝卜素类似的 色素，于是就把这类物质叫做胡萝卜色素类化合物，或者叫做类胡萝卜素。这类化合物大都 难溶于水，易溶于弱极性或非极性的有机溶剂，因此又把这类物质叫做脂溶性色素。 胡萝卜素是一种天然的食物色素，主要存在于深色蔬菜，绿色、红色、深绿色的蔬菜中和黄色的， 橘色的水果(如胡萝卜、菠菜、生菜、马铃薯、 番薯、 西兰花、哈蜜瓜和冬瓜 )等有色植物中。胡萝卜素与维生素A结构相近，活性较高的有α、β、γ胡萝卜素，其中β胡萝卜素活性最高。胡萝卜素是一种脂溶性色素，脂肪有助于它被人体的吸收。β胡萝卜素的主要作用是：1．它是高效的维生素a源，在体内，根据体内维生素A量的多少，β胡萝卜素可自动分解而补充维生素A的不足。而且，胡萝卜素食一种十分安全的维生素A原，可较多地贮存在肝脏内，根据人体内维生素A的水平，胡萝卜素可自动逐步转化为维生素A，不会由于维生素A过量而中毒。2．对体内氧自由基的清除作用。氧自由基是引起肿瘤、衰老、 心血管疾病的主要原因之一。天然β－胡萝卜素的独特结构使它充当了体内氧自由基的“清道夫 ”，从而起到防癌、抗衰老的重要作用。3．免疫保护作用 ,天然β－胡萝卜素可提高体内各种免疫淋巴细胞的数量和增殖反应能力 ， 增强自然杀伤细胞对肿瘤细胞的杀伤作用和中性细胞的吞噬作用，从而巩固了人体的防御体系，起到祛病防身