脲型Cerasome的類脂的合成及制备研究111111.doc

脲型Cerasome的类脂的合成及制备研究成果 指导教师：王剑锋 主研人：刘利 成员:于康妮、陈娟 超分子化学的发展方向之一是构建脂质体的高阶结构，即构成稳定可靠结构的层层堆积的超分子聚集体，这是制备新材料重要基础，从仿生化学角度看单个脂质体作为人工细胞模型，脂质体多聚体则可以作为人工组织的模型。但是传统的脂质体靠疏水作用存在于水中，脂质体自身不够稳定，因此在本研究中制备的有机无机杂化脂质体Cerasome具有表面硅氧键构成的类似于陶瓷结构的网络连接，因此大大强化了脂质体的稳定性，而且因为类脂还含有酰胺键类似于肽键结构，因此在脂质体中形成一圈氢键带，也对脂质体的稳定起到了辅助作用。 关于脂质的合成，目前已经进行了很多的工作，合成出了大量带有不同官能团，应用在各领域的脂质。由生物源材料合成的脂质既具有合成脂质易于分离提纯、稳定不易氧化的特点、又具备生物源脂质无毒及无免疫源性的特点，由其制成的脂质体可以做作为药物载体或仿生分子器件组成成分的首选。 本研究从仿生化学的角度出发，制备了一种种有机-无机杂化脲型脂质Cerasome，同时合成两种含Schiff碱结构人工受体，并将其嵌入到Cerasome脂质膜上，构建了两种人工细胞信号转导的超分子体系。在制备Cerasome脂质体的过程中，一般采用乙醇注射法和薄膜振荡超声法，在第一种制备法中，首先要把类脂在酸性乙醇溶液中水解经过溶胶-凝胶过程，然后注入在水溶液中通过自组装形成Cersome。但是当需要在脂质体中嵌入某种设计的分子时，尤其是疏水性比较强的有机分子的时候，由于有机分子不能溶到酸性乙醇的水解液中，因此不能通过这种注射的方法进行制备。第二种方法中，薄膜震荡超声法是首先将脂质体溶解在氯仿中，然后吹干制成薄膜并真空干燥，加入水溶液后，震荡超声制成脂质体，但是这种制备方法适合具有极性头部的类脂分子，而对于本研究中的Cerasome的类脂分子还没有进行水解，头部也是疏水性的，因此此法也不适合。在本实验中我们综合了上述两种方法，首先在酸性乙醇溶液中进行水解，然后吹干，加入适当的有机分子，用氯仿溶解，制成薄膜，然后加入水溶液震荡超声制成脂质体。 一、实验药品与实验仪器 1.1实验药品 表1 主要试剂 Tab. 1.1 Key Reagents 名称 规格 生产厂家 十六烷基溴 99.0% Acros Organics 十六烷基胺 99.0% Fluka 丁二酸酐 98% Aladdin 二环己基碳二亚胺（DCC） 分析纯 吉尔生化（上海）有限公司 3-氨丙基三乙氧基硅烷 分析纯 Aladdin 异氰酸丙基三乙氧基硅烷 99.0% 东京仁成工业株式会社 4-羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPES） 99.9% Solarbio 甲醇 分析纯 天津市科密欧化学试剂开发中心 无水乙醇 分析纯 天津市科密欧化学试剂开发中心 三氯甲烷 分析纯 天津市科密欧化学试剂开发中心 柠檬酸 分析纯 天津石英钟厂霸州市化工分厂 乙腈 分析纯 天津市风船化学试剂有限公司 乙酸乙酯 分析纯 天津石英钟厂霸州市化工分厂 二氯甲烷 分析纯 天津市科密欧化学试剂开发中心 柱层层析硅胶 200-300目 上海五四化学试剂厂 二苯甲酮 99.0% Sigma 分子筛 4A 1/16 日本和光纯药工业株式会社 1.2 实验仪器 表2 实验仪器 Tab. 1.2 Experimental instruments 仪器名称 型号 生产厂家 旋转蒸发仪 BUCHI R-200 瑞士BUCHI公司 数显可调真空干燥箱 DZF-I50 郑州长城科工贸有限公司 电热恒温鼓风干燥箱 DHG-9123A 上海精宏实验设备有限公司 集热式恒温磁力搅拌器 DF-101S 河南省巩义市英欲予华仪器厂 超声波清洗仪 B5200SDT 大连博信超声设备有限公司 循环水式真空泵 SHZ-D(Ⅲ) 河南省巩义市英欲予华仪器厂 电子天平 Adventurer AR1140 美国OHAUS 公司 核磁共振仪 Varian 400MHz 美国Varian 公司 超纯水机 Milli-Q Academic 美国Millipore公司 紫外/可见分光光度计 Lambda25 美国PerkinElmer公司 漩涡振荡仪 Vortex-Genie 2 美国ScientificIndustries 公司 杯式/探头超声仪 Sonifier 250D 美国 BRANSON公司 透射式电子显微镜 JEM-2000EX 日本JEOL公司 精密pH计 S20P 瑞士Mettler Toledo公司 纳米粒度/Zeta电位分析仪 SZ-100 日本HORIBA Scientific 公司 薄层硅胶板 Silica gel 60F25