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色谱法的方法原理介绍以及写作方法 1 色谱法的定义： 色谱法是一种重要的分离方法，它是根据组分在两相中作用力不同而达到分离的目的。 2. 色谱法的应用： （1）可用于反应过程的监测和跟踪； （2）可用于混合物的分离； （3）可用于无机有机化合物的分离； （4）可用于化合物原料、产物的鉴定； （5）还可以检验纯度。 3.色谱法的特点 （1）与经典分离提纯手段（重结晶、升华、萃取和蒸馏）等相比，色谱法具有快速、简单高效的优点，并能对复杂化合物甚至立体异构进行分离。 （2）液相色谱适用于固体物质和具有高蒸汽压的油状物质的分离，不适合低沸点液体的分离。气相色谱适合于容易挥发物质的分离。 4.色谱法的分类 薄层色谱按固定相的外形分类 薄层色谱 纸色谱 纸色谱 按分离机制分类 亲和色谱法凝胶色谱法或尺寸排阻色谱法离子交换色谱法分配色谱法吸附色谱法 亲和色谱法 凝胶色谱法或尺寸排阻色谱法 离子交换色谱法 分配色谱法 吸附色谱法 5. 柱色谱的原理 柱色谱法是最原始的色谱方法，这种方法将固定相注入下端塞有棉花或滤纸的玻璃管中，将被样品饱和的固定相粉末摊铺在玻璃管顶端，以流动相洗脱。常见的洗脱方式有两种，一种是自上而下依靠溶剂本身的重力洗脱，一种是自下而上依靠毛细作用洗脱。收集分离后的纯净组分也有两种不同的方法，一种方法是在柱尾直接接受流出的溶液，另一种方法是烘干固定相后用机械方法分开各个色带，以合适的溶剂浸泡固定相提取组分分子。 柱色谱法被广泛应用于混合物的分离，包括对有机合成产物、天然提取物以及生物大分子的分离。 6. 色谱流出曲线及有关术语 色谱峰：由检测器输出的信号强度对时间作图，所得曲线称为色谱流出曲线。曲线上突起部分就是色谱峰。 如果进样量很小，浓度很低，在吸附等温线（气固吸附色谱）或分配等温线（气液分配色谱）的线性范围内，则色谱峰是对称的。 基线：操作条件稳定后，仅有流动相 通过检测器时，仪器检测到的信号称为基线。 峰高：色谱峰顶点与基线之间的垂直距离称为色谱峰高； 柱效较高，△K(分配系数)较大,完全分离；△K不是很大，柱效较高，峰较窄，基本上完全分离；柱效较低，△K较大,但分离的不好；△K小，柱效低，分离效果更差。 死时间 tM：不被固定相吸附或溶解的物质进入色谱柱时，从进样到出现峰极大值所需的时间称为死时间，它正比于色谱柱的空隙体积。 保留时间tR 试样从进样到柱后出现峰极大点时所经过的时间，称为保留时间。 7.色谱的定性分析： 色谱定性分析就是要确定各色谱峰所代表的化合物。由于各种物质在一定的色谱条件下均有确定的保留值，因此保留值可作为一种定性指标。目前各种色谱定性方法都是基于保留值的。 保留时间是色谱法定性的基本依据，但同一组分的保留时间常受到流动相流速的影响，因此色谱工作者有时用保留体积来表示保留值。 色谱定性分析的依据是物质的保留行为。色谱定性分析方法很多，主要有三个方面：直接利用物质的保留行为。 8. 色谱定量分析 色谱定量 分析的依据是通过检测器的被分析物质的量与检测器的响应讯号（峰面积或峰高）成正比。 mi= fiAi式中：mi—为组分i的质量；Ai—为组分i的峰面积；fi –为组分i的定量校正因子。 9。从色谱流出曲线中可以获得的信息 样品所含组分的最少个数； 定性分析（保留值）； 定量分析（峰高或面积）； 分离效能（保留值及区域宽度）； 两相选择的依据（峰间距离） 10. HPLC 目前研究和使用较多的液相色谱主要有高效液相色谱法(HPLC)HPLC 已经成为目前分离和纯化生物大分子最重要和最有效的分析和分离方法,它具有分离效率高、分析速度快、检测灵敏度高和应用范围广的特点, 特别适合于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物的分离分析。原理： 11. 在SCI写作中的应用 （1）在材料方法中，应写清楚混合物的预处理方法。 （2）写清固定相柱子的材料和流动相。 （3）有的结果图在材料方法中体现。 （4）不同的研究目的 写作的倾向性不同。