绿原酸指纹图谱.doc

单位代码:10160 编 　号: 2016014085139 学士学位论文 题　目： HPLC银翘天甘含药血清中绿原酸 Content Determination of Chlorogenic Acid in Medicated Serum of Yinqiaotiangan by HPLC 学 院： 畜牧兽医学院 专 业： 动物医学 年 级： 2012 姓 名： 张 指导教师：  摘要 1 Abstract 2 前言 3 1 材料与方法 5 1.1 材料 5 1.2 方法 5 2 结果与分析 6 2.1 银翘天甘含药血清的HPLC图谱 6 2.2 标准曲线 7 2.3 方法学考察结果 7 3 讨论 8 3.1 血清脱蛋白方式的选择 8 3.2 色谱条件的确定 8 3.3 保留时间变化的原因分析及解决方法 9 4 结论 9 参考文献 10 致谢 11 银翘天甘含药血清中绿原酸 摘 要 HPLC）测定银翘天甘含药血清中绿原酸的含量的方法。采用Phenominex C18色谱柱，甲醇:1%冰乙酸溶液=1585（v/v）梯度洗脱，流速：1.0 m/min；检测波长327 nm，高效液相色谱（HPLC）仪检测。对考察，结果显示μg/ml范围内浓度与峰面积呈线性关系，其标准工作曲线方程为y=0.0000003x-0.0038，R2=0.9977，说明该方法具有良好的稳定性、精密度和重现性可用于银翘天甘含药血清。 关键词：银翘天甘；含药血清；绿原酸； Content Determination of Chlorogenic Acid in Medicated Serum of Yinqiaotiangan by HPLC Abstract To establish the high performance liquid chromatography (HPLC) method for the determination of chlorogenic acid in medicated serum of Yinqiaotiangan. Chromatograph column of Phenominex C18 was adopted,and mixtures of methyl alcohol and glacial acetic acid 15：85（v/v）were used as the mobile phase,and test was done at a flow rate of 1.0 ml/min,with detection wavelength of 327nm.chlorogenic acid by HPLC to calculate the content determination of chlorogenic acid in medicated serum of Yinqiaotiangan. Then the establishment of a method for learning were investigated. The results showed that chlorogenic acid in 20-100μg/ml range concentration and peak area showed a linear relationship, the standard working curve equation for y=0.0000003x-0.0038，R2=0.9977chlorogenic acid in detection. Key words:Yinqiaotiangan；medicated serum；Chlorogenic acid； 前 言 1.绿原酸的概述及研究进展 绿原酸（Chlorogenic acid，以下简称 CA），分子式：C16H18O9，分子量：354.30，是由咖啡酸与奎尼酸生成的缩酚酸，异名咖啡鞣酸，是植物体在有氧呼吸过程中经莽草酸途径产生的一种苯丙素类化合物。绿原酸的性状为白色或微黄色针状结晶，熔点 208℃。绿原酸在 25℃时水中溶解度约为 4％，易溶于乙醇、丙酮、甲醇等极性溶剂，微溶于乙酸乙酯，难溶于三氯甲烷、乙醚、苯等亲脂性有机溶剂。绿原酸具有广谱的抗细菌、抗病毒的作用，有很好的抗氧化作用[]。因此，绿原酸是众多药材和中成药抗菌解毒、消炎利胆的主要成分。本研究所用的银翘天甘复方组剂是以金银花、连翘、天花粉、甘草4味中药组方，遵循君臣佐使的配伍理论，为自主研发的清热解毒类中药方，绿原酸为银翘天甘制剂的主要活性成分。 绿原酸不但是