mRNA差异显示方法究进展.docVIP

目的：应用荧光标记的mBNA差异显示技术。 方法：提 取未经过／经过IFN、LPS处理的三组人单核细胞系U937的总RNA并以此为模板，采用荧光标 记的锚定引物，通过逆转录、差异显示PCR反应，经5．6％变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离差 异条带，回收后将其再扩增。结果：三组样本的 DD-PCR产物电泳显示长30 0 bp～2.0 kb不等的扩增片段，条带清晰、明亮，背景低，各样本相互间的差异不仅呈有 无的变化，亦表现出很多强弱改变；再扩增条带锐利、单一。结论：在本试 验室成功应用了荧光标记差异显示技术，可快速、敏感、经济有效地筛选各种未知的表达基 因。　　中图分类号：　Q781文献标识码： B　　文章编号：1000-6834(200 0)04-0373-04FLUORESCENT mRNA DIFFERENTIAL DISPLAY TECHNIQUEWANG Gang-shi　　（Department of Gastroenterology General Hospital of Chinese PLA , Beijing 100853;）　　WANG Meng-wei　　（Department of Gastroenterology General Hospital of Chinese PLA , Beijing 100853;）　　YOU Wei-di　　（De