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- 2016-11-29 发布于贵州
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nuclear prmers
1、胡桂兵,林顺权,叶自行,徐昌杰,张上隆杧果LEAFY 同源基因的分离及序列分析. 亚热带植物科学,2004,33(2):1-4
在比较其它物种上已克隆的LEAFY 基因序列的保守区后设计一对长度均为23bp 的特异引物,上游引物:5’-GAAGTGGCGCGTGGGAAAAAGAA-3’;下游引物:5’- CGGAGCTTGGTGGGAACGTACCA-3’。PCR 体系:10×PCR 缓冲液(含Mg2+)5.0μl,dNTPs(各自2.5mmol/L)4.0μl,上游引物1.0μl,下游引物1.0μl,模板DNA4μl,Ex Taq(5U/μl)0.5ìl,加灭菌双蒸水至总体积50μl。扩增程序为:94℃变性5min 后,按94℃,50s→55℃,70s→72℃,150s 进行35 个循环,最后72℃延伸10min 结束。
刘月学 , 胡桂兵, 林顺权, 刘宗莉, 陈厚彬. 枇杷L EAFY同源基因的克隆及序列分析华南农业大学学报, Vol. 26 , No. 2
比较其他物种上已克隆的LEAFY (LFY) 序列保守区后设计了1 对长度均为25 bp 上海生工公司合成.
上游引物A: 5′GARGTGGCGCGCGTGGSAARAAGAA-3′;
下游引物: 5′-CAGAGYTTGGTGGGMACRTACCA-3′.
10 ×PCR 缓冲液、DL2000
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