基因工程(拓展2008.10.30).pptVIP

DNA连接酶的作用过程 第一步：获取目的基因 ⒈概念：指依据预先设计的蓝图，用人工的方法将某种生物的基因，结合到另一种生物的基因组ＤＮＡ中并使其表达，使后者获得新的遗传性状，产生出人类所需要的产物，或创造出新的生物类型的现代生物技术. * * * 哎，这可怎么办啊？ 苏云金杆菌 苏云金杆菌能产生一种物质,具有杀死棉铃虫的功能，对人、畜禽、水产无害,对植物无毒,是安全、无害、无残毒的生物杀虫剂, 科学家经过提取鉴定发现该物质是一类蛋白质：命名为Bt 毒蛋白。 研究发现 Bt 毒蛋白--就用它了! 环保无污染！多好啊！ 如果棉花能够自己产生Bt毒蛋白那该多好啊！ 是啊！这样就可以省力又省钱，划算！可怎样才能够……..? 基因工程 怎样才能获得苏云金杆菌的Bt 毒蛋白基因？ 怎样才能将苏云金杆菌的Bt 毒蛋白基因导入 棉花植株细胞内？ 怎样才能使苏云金杆菌的Bt 毒蛋白基因与运 载体进行重组？ 怎样才表明目的基因已成功导入受体细胞？ 问题探究 由于限制性内切酶的发现，阿尔伯、史密斯和内森斯共享1978年诺贝尔生理和医学奖。 1968年，阿尔伯、内森斯和史密斯第一次从大肠杆菌中提取出了识别DNA上特定脱氧核苷酸序列，并在特定的“切点”，将DNA分子的双链交错地切断的“分子剪刀”——限制性内切酶。 化学剪刀 1、限制性核酸内切 酶 基因工程中必要的工具 ……T A G A A T T C T C ….. T A T G A A T T C A C…… …… A T C T T A A G A G …... A T A C T T A A G T G…… 识别序列 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G 酶切位点 酶切位点 限制酶--Ecor1 粘性末端 粘性末端 限制酶的专一性 　　一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切割点上将DNA 分子切断。目前已发现的限制酶有200多种。 2、DNA 连接酶 化学浆糊 基因工程中必要的工具 1967年，罗思和海林斯基发现细菌拟核DNA之外的质粒有自我复制的能力，并且可以在细菌细胞间进行转移。 3、运载体 分子运输车 基因工程中必要的工具 载体必须同时满足三个要求：①能与目的基因结合；②能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制并表达；③比较容易得到。 基因工程基本步骤 即获取含有所需要完整遗 传信息的DNA片段。 第二步：目的基因与载体的重组 　　用与提取目的基因相同的限制酶切割质粒使之出现一个切口，将目的基因插入切口处，让目的基因的黏性末端与切口上的黏性末端互补配对后，在连接酶的作用下连接形成重组DNA分子。 第三步：重组DNA分子的导入 重组的DNA分子导入到受体细胞中，并使目的基因在受体细胞内能准确地转录和翻译。 导入 扩增 第四步：筛选含目的基因的受体细胞 得到目的基因的受体细胞极少，必需筛选出已获目的基因的细胞。 将每个受体细胞单独培养形成菌落，检测菌落中是否有目的基因的表达产物。淘汰无表达产物的菌落，保留有表达产物的进一步培养、研究。 无表达产物 无表达产物 有表达产物 无表达产物 → 这下我就满足了！ 据统计：种植转基因抗虫棉每公顷可降低农药、用工等成本900——1200元，增加收入1800——2100元，每年为国家和棉农增收节支50亿——60亿元!!! 转基因抗虫棉的推广效应 崇明白山羊肉味鲜美，而?且具有暖脾胃、补身虚，强身壮骨,生产的小包装红焖羊肉曾被评为农业博览会金奖，并获得绿色食品标志使用权。 羊奶很少被利用 ！ 背景资料 据统计，本地存在α1-抗胰蛋白酶缺乏 症病人，该病是一种血中抗蛋白酶成份- α1-抗胰蛋白酶（简称α1-AT）缺乏引起的 一种先天性代谢病，通过常染色体遗传。临 床特点为新生儿肝炎，婴幼儿和成人的肝硬 化、肝癌和肺气肿等。 背景资料 α1-抗胰蛋白酶缺乏症 含人α1-抗胰蛋白酶基因的 转基因崇明白山羊 基因工程 ⒉特点：基因工程能够打破种属的界限，在基因水平上改变生物遗传性，并通过工程化手段为人类提供有用的产品及服务。 * *