绒山羊研究进展报告.pptVIP

高产绒量转基因绒山羊新品种培育 内蒙古农业大学承担任务 研究进展 一、绒山羊绒毛生长相关基因的获得与筛选 （一）利用抑制消减杂交法(SSH)构建绒山羊次级毛囊生长期（正）与休止期（反）的两向消减文库 （二）应用cDNA芯片与SSH结合筛选绒山羊绒毛生长相关的差异表达基因 （三）绒山羊出生2周羊羔皮肤和70天胎儿皮肤差异表达基因的筛选 （一）利用抑制消减杂交法(SSH)构建绒山羊次级毛囊生长期（正）与休止期（反）的两向消减文库 SSH消减杂交 兴盛期毛囊和休止期毛囊cDNA片段互为Tester和Driver，两轮消减杂交后，得到差异表达基因片段 2.差异表达基因cDNA片段的T/A克隆及鉴定 3. 序列测定及结果分析 经生物信息学分析，发现与山羊类同源的序列较少，正向SSH消减文库309条序列中，山羊只有57条；反向消减文库344条中，山羊的有35条。因此，所获得的数据，极大丰富了山羊的数据资源。 4. ＊序列注释结果的功能分类 （二）应用cDNA芯片与SSH结合筛选绒山羊绒毛生长相关的差异表达基因 在消减文库的基础上，进行了两次荧光交换的cDNA芯片杂交，以筛选差异表达基因，芯片杂交结果见下表 生长期次级毛囊的差异表达基因 发现6个次级毛囊生长期的差异基因： 上调基因3个：Sortilin、成纤维细胞生长因子受体底物及未知基因1个； 下调基因3个： SPRY2 、 Ras癌基因家族成员RAB11A及未知基因1个。 生长期 未匹配 2个 Z80 TGAGAGCTTTAAAATTCCTGCAATGGTGCAAATTTTCTTAATTGAAAAATAATAAAATAA GGAGGAAAAAAAATCTAAATTTAGTCCTGCACTGAAATCCTCACCTTTGAAAAACTCTCA AGATAAAGATTTAGTAGAAACCCCATTCTCCATCATACTCTGGCTGATAAAGAAAACACA GCCACGCAAACAATAATTTAACACGAGCCAAAACAAAAGTGTTTTCAGAAAGAAGCTAGT GTTGGCGATTTAAAGGTTTCCACTATGTCTGAGCATCTCCAATACAAATACCTTATGTAT TTAAGGGAAGCTTCACAAGTCAAAAGCAATTTCACATAAATGATTCAATTCTTACCGTAA GCCCGTGACTTAAGCAGGGTAGGGATTATCTGCCTGGATTTGAGACATTACCAACCCAGT AAAAACGGGGATAAAAGACTGGCTATAAAAATGTAGCACTTCGTTTCCAAAAAAAAAAAG TATTCTTACTAAAACAACAAAATGGCCCG Z42 CTTGAGTTAGTAGGAGCTTTTACATGTGGTAAAAGGCTATTACTTAAACTCCATGAATTA AGGTAATTCTAACATTCTCCATTTTATGGCTCTAGCACCAAAGACCCAAAGCAGTGATAC TGCATTGAACCATCCTTAGATTGCAGGCCCACTCTGGAGGCCAAGGTCCTAGGTGTTTTG TTGAAGGCTGTGTGTAAGT 休止期次级毛囊的差异表达基因 休止期 未匹配 2个 F59 TTTTTCTCCCTAAAAAAAAAGAATTTTTTTTTTTGTTTTTTTCTAAAAAATGAAAAAAAA CCCCCCCCCCCCCGCCGGGGGGGGGGGGGAAAACTAAAAATATCGGGGGGGGGGGGACCC AAGGGAAAATAGGGTGGGTGCCAAAACCCACCCCCCCCCGGCACCCGAAAAAACCCAAAA AAAAGACCCCCCCCCCCCCTTCTTATGCCACCACCCCCCCCCCTGAAAAAAACAACCACC CATAAAAAAAAACACAACAAATACTCTCCGCCGGGTTGTTTTCAGGGAGCCGGCAAAAAA AAAAACAACAAAACTGCCCAAAAAATCCCTAACCAAACGACAACCCCCAACAATAAAAAG AAACAACCCCCCCCCCGCAGGCACCGCTCATGAAATAAAGTTCCCCAACACAAAAAAGGG GGGGGGGTTTTCCGCCCCCCCCCCACACCATCAAATATAATTGCCCCCCCCCCCCAGGCG ATAAAGGGGGAGAAACCCCCCCCCCCGGCGGGGGGGGACGGTTTTTTTTCTTTTTTTTGG GGGCCCCCCCA F8