分子标记技术及其应用_ISSR摘要.pptVIP

ISSR分子标记及其在果树遗传学的应用 果树学 刘志发 主要内容 ISSR分子标记 ISSR分子标记的基本原理和特点 ISSR分子标记实验操作 ISSR分子标记在果树遗传学的应用 问题与展望 ISSR分子标记 ISSR分子标记是在SSR分子标记基础上发展起来的一种DNA多态性检测技术。即锚定简单重复序列（anchored simple sequence repeat，ASSR），也称作简单重复间序列(inter-simple sequence repeat，ISSR)标记技术或以微卫星为引物的PCR(microsatellite primed PCR,MP-PCR) 。 它是由加拿大蒙特里尔大学的Zietkiewicz等1994年提出的 。 ISSR分子标记的基本原理和特点 基本原理 特点 PCR扩增反应的最适条件需要一定时间摸索。 ISSR标记大多是显性标记，不能区分显性纯合基因型和杂合基因型。 ISSR分子标记实验操作 DNA样品的提取 引物设计 PCR扩增反应 PCR产物的电泳及数据分析 DNA样品的提取 提取植物DNA的方法有很多，用于ISSR分子标记的DNA样品的提取方法有： SDS法 CTAB法 引物设计 引物设计是ISSR技术中最关键、最重要的一步。用于ISSR的引物常为5＇端或3＇端加