微生物反应器生产细胞物质.docVIP

微生物反应器生产单细胞蛋白 【摘要】 装有固定化酶的容器，能进行生物化学合成，是生物工程中的两大支柱 Yp：产物产率系数(product yield) 好氧微生物反应： CHmOn＋a NH3＋bO2 = Yx/cCHxOyNz＋Yp/cCHuOvNw＋(1-Yx/c-Yp/c)CO2＋cH2O (15.2.2) a=zYx/c+wYp/c b=(1-Yx/c-Yp/c+m/4-n/2)+(Yp/c/4)(-u+2v+3w)+(Yx/c/4)(-x+2y+3z) c=m/2+( Yp/c/2)(-u+3w)+ (Yx/c/2)(-x+3z) 2.以基质质量为基准的细胞产率系数Yx/s ，反应系统中细胞的生长量（细胞干燥质量）与反应消耗掉的基质的质量之比[单位：kg (细胞) /kg (基质) ]，Yx/s=细胞的生长量/反应消耗的基质量 3.微生物的生长速率的定义：rx=Dx/Dt=μX，X：活细胞浓度，mg/L；μ：比生长速率(specific growth rate)，h-1。 4.反应器内基质和细胞浓度的计算：若微生物的生长符合Monod方程，参照不带细胞循环的连续反应器的解析方法，可得到反应器内X和S的计算式：，，。 5.微生物生长速率与基质浓度的关系 Monod（莫诺特）方程： S：生长限制性基质的浓度，mg/L； μmax ：最大比生长速率，h-1； Ks：饱和系数，mg/L。Ks与μ＝μmax/2时的S值相等 用于生产单细胞蛋白的生物种类。用于生产单细胞蛋白的微生物种类很多，包括细菌、放线菌、酵母菌、霉菌以及某些原生生物。这些微生物通常要具备下列条件：所生产的蛋白质等营养物质含量高，对人体无致病作用，味道好并且易消化吸收，对培养条件要求简单，生长繁殖迅速等。单细胞蛋白的生产过程也比较简单：在培养液配制及灭菌完成以后，将它们和菌种投放到发酵罐中，控制好发酵条件，菌种就会迅速繁殖；发酵完毕，用离心、沉淀等方法收集菌体，最后经过干燥处理，就制成了单细胞蛋白成品。 细菌蛋白 细菌蛋白的生产一般是以碳氢化合物（如天然气或沥青）或甲醇作为底物，它们的蛋白质含量占干重的3/4以上，必需氨基酸组成中同样缺乏含硫氨基酸，另外它们所含的脂肪酸也多为饱和脂肪酸。 这两种微生物蛋白一般不能能够直接食用，需要除去其中的细胞壁、核酸和灰分等杂质，其原理在工艺上与大豆的加工处理类似。细菌蛋白提取处理后得到细菌分离蛋白，它的化学组成与大豆分离蛋白相近，并且在补充含硫氨基酸以后，它的营养价值与大豆分离蛋白也相近。 酵母蛋白 真菌中的酵母在食品加工中应用较早，包括酿造、烘烤等食品。酵母中蛋白质的含量超过了干重的一半，但相对缺乏含硫氨基酸。另外，由于酵母中含有较高量的核酸，若摄入过量的酵母蛋白则会造成血液的尿酸水平升高，引起机体的代谢紊乱。 下面是一个具体的利用微生物反应器生产单细胞蛋白的实例。应用海藻酸钙固定化面包酵母反应器，以糖蜜为原料连续生产单细胞蛋白。 材料与方法 1.材料 菌种:面包酵母；海藻酸钠；糖蜜。 实验方法 液体酵母培养:将斜面上的啤酒酵母接种入10ml麦汁内(5.0巴林)，30℃下培养22小时，然后接入100ml，5.0巴林麦汁内(25oml三角瓶)，30℃摇床培养6小时。 固定化酵母的制备:将酵母培养液与2%海藻酸钠溶液混匀(每毫升混合液内酵母细胞为5.1又106个)，用注射器滴入1.0%的氯化钙溶液内，制成直径为2mm的定化酵母凝胶珠。 固定化细胞增殖:将10克固定化胶体颗粒放入含100ml，10巴林麦汁的三角瓶(25oml)中，30C下摇床培养65小时。 2.分析方法 糖制测定：DNs法 细胞浓度测定:光密度法[3]；和血球计数法[4]。 PH值测定：用PI始一2型酸度计。 微生物反应器反应过程 微生物的连续培养的操作方式：将不含有菌体和产物的物料（培养液、污水等）连续加入反应器，同时连续将含有微生物细胞和产物的反应混合液取出。连续操作通常以间歇操作开始，即开始时先将培养液加入反应器，将微生物接种后进行间歇培养，当限制性基质被基本耗尽或微生物生长达到预期浓度时开始连续加入培养液，同时排出反应后的培养液。 立或枉状反应器为有机璃制成(中8.0X40cm)，柱内上下各设一块筛板，下部筛板下装上空气分布器，柱底部设进液与通风口，在32cm处设出液口，顶部设出气口。在上下筛板之间装固定化胶体。柱内固定化胶体与培养基体积的总和称为反应器工作体积，为1.61。以此为基础定义稀释速率D值。反应器温度是通过夹套控制的。反应均在相同器温(