枯草杆菌芽孢的高压热处理杀菌效果研究.docVIP

学校代码：___11059_______ 学 号：___1202021026_ Hefei University 毕业设计（论文） BACHELOR DISSERTATION 论文题目：枯草杆菌芽孢的高压热处理杀菌效果研究 学位类别： 理学学士 学科专业： 生物技术 作者姓名： 刘耀文 导师姓名： 谢宁宁 完成时间： 二〇一六年六月 枯草杆菌芽孢的高压热处理杀菌效果研究 摘 要 为了进一步探索高压热处理(HPTS)对芽孢的杀灭效果和机理，为低酸性食品的高压生产应提供理论依据，本研究将枯草杆菌芽孢在富集Mn2+的培养基上于37 ℃下培养7天后悬浮于无菌去离子水中，经过18、38、43、50、58 ℃下，300和500 MPa分别保压0、5、10、20 min的HPST杀菌处理。再利用平板计数评价HPTS的杀菌效果；采用胞外电导率评价阳离子泄露率；以流式细胞染色结果衡量芽孢内膜透性变化；以胞外紫外吸收物质（A260和A280）含量表征核心损伤程度；测量菌群萌发率和胞外2,6-吡啶二羧酸(DPA)含量判断芽孢是否萌发。研究取得如下结果： 1. 常温高静压（18、38 ℃）对芽孢的钝化效果不明显，HPTS对芽孢的作用受温度、压力和保压时间的影响。基本上，随着温度升高、压强增加、保压时间延长，杀菌效果越好。本实验中杀菌效果最好的条件为58 ℃，500 MPa下保压20 min，达到2.1个对数值。 2. 所有条件的温度结合超高压实验处理，都显著破坏了芽孢内膜，与芽孢DNA结合并发射强荧光，当处理条件为50 ℃，300 MPa下保压5 min时对枯草杆菌芽孢紫外吸收物质泄漏的影响最大。 3. 在其他条件一致的情况下，温度越高、压强越大、保压时间越长则芽胞萌芽率越低，本次实验使芽孢萌芽率最低的处理条件为500 MPa，58 ℃，20 min。 关键词:HPTS；枯草杆菌芽孢；杀菌效果；阳离子泄露率；芽孢内膜透性 Inactivation effect of high pressure thermal sterilization on Bacillus subtilis spores ABSTRACT This study aims to further explore the inactivation effect and mechanism of high pressure thermal sterilization (HPTS) on Bacillus subtilis spores, and promote the development of low acid food non-thermal processing technologies. Bacillus subtilis spores were cultivated on culture medium rich in Mn2+ at 37℃ for 7 days then suspended in sterile de-ionized water. Then HPTS process was carried at 18, 38, 43, 50 and 58 ℃ under 300 and 500 MPa for 0, 5, 10 and 20 min respectively. By means of plate count the inactivation effect of HPTS on spores was evaluated, the permeability of membrane was measured by flow cytometry staining; extracellular ultraviolet absorption substance (A260 and A280) content was used to characterize the core damage; flora germination rate and the cell outer 2,6-pyridine dicarboxylic