大学毕业设计—食用菌工厂化生产污染菌的研究.docVIP

关于食用菌工厂化生产污染菌的研究 摘 要Pseudomonas putida，S2为Pseudomonas marginais。 关键词：生化检验 杏鲍菇 16SrRNA基因 Pseudomonas putida Pseudomonas marginais Abstract In places of production bacteria were repeatedly isolated. From these lesions two bacterial strains (designated S1, S2) vaccination to the packages, then produce the same kind of illness.Results of Gram stain and biochemical tests preliminarily identified these isolates as Pseudomonas. Physiological and biochemical properties, analysis of the 16SrRNA sequences, identified S1 as Pseudomonas putida. Pseudomonas ,and S2 as Pseudomonas marginais. Keywords Flammulina velutipes . Pleurotus Eryngii. Pseudomonas putida. Pseudomonas marginais . 16SrRNA gene . 目 录 1.引言 1 1.1课题研究背景 1 1.2课题国外研究状况 1 1.3常见细菌病害 2 1.4课题主要研究内容 2 2. 材料与方法 3 2.1主要仪器和培养基 3 2.1.1主要仪器 3 2.1.2主要培养基 3 2.2 病原菌的分离纯化 4 2.3 病原菌的形态观察及染色 7 2.4 病原菌的生理生化性状 7 2.4.1葡萄糖氧化发酵作用的测定 3 2.4.2氧化酶 4 2.4.3色素的产生 4 2.4.4接触酶 4 2.4.5甲基红试验（M.R.试验） 5 2.4.6乙酰甲基甲醇试验（V.P.试验） 5 2.4.7产生吲哚试验 5 2.4.8水解七叶灵 6 2.4.9明胶水解 6 2.4.10水解淀粉 6 2.4.11反硝化作用 7 2.4.12硝酸盐还原试验 7 2.4.13碳源的利用 8 2.4.14卵磷脂酶测定 8 2.4.15精氨酸双水解反应 8 2.5 运动性的检查 7 2.6 16S rDNA序列测定与分析 7 2.6.1 变性 8 2.6.2 PCR 扩增 8 2.6.3测序 8 2.7 抑菌剂的筛选 9 3．结果与分析 10 3.1 病原菌的固体培养特征 10 3.2 病原菌的个体形态特征 11 3.3 16S rDNA序列分析 13 3.3.1菌株S1的16S rDNA序列分析 13 3.3.2菌株S2的16S rDNA序列分析 14 3.4 病原菌的生理生化性状 17 3.4.1菌株S1的生理生化特征 17 3.4.2菌株S2的生理生化特征 18 3.5 抑菌剂的筛选 20 参考文献 20 致谢 21  1．引言 1.1课题研究背景 Pleurotus eryngii日名“雪茸”隶属于伞菌目(AgaricaIes)，侧耳科 (Pleurotaceae)，侧耳属(Pleurotus)。杏鲍菇以其“香味浓郁似杏仁、味道鲜美如鲍鱼一而得名，子实体硕大粗壮、营养丰富、菌柄洁白、菌肉肥厚、质地脆嫩，既可保鲜加工，又可与鱼、肉等合一烹饪，是近年来中国重点开发的珍稀菇种之一[1]。 近年在杏鲍菇工厂化生产过程中出现了严重的污染菌，有些菇农种植的杏鲍菇其污染率超过了50％以上，杏鲍菇生产因污染菌造成的损失达亿元以上。目前在杏鲍菇栽培过程中, 一些细菌性病害已成为生产中的一大障碍, 严重时几乎全部失败。多年来, 我们研究对造成杏鲍菇病害的细菌对指导食用菌生产具有一定的现实意义, 对提高杏鲍菇栽培的产量、质量和效益发挥了很大作用。 1.2课题国外研究状况[2]。 1.3常见细菌病害[3] 1.3.1细菌性斑点病, 又叫细菌性褐斑病,主要危害蘑菇和平菇。 发病症状 局限于菌盖上, 菌盖初期出现水渍状小斑点, 渐渐变成黄褐色并扩大成小斑, 不规则, 凹陷, 凹陷处呈棕褐色。湿度大时, 凹斑内有粘稠的菌液, 当病斑干后,菌盖往往开裂。 病原该病由托拉斯假单胞杆菌引起。 1.3.2细菌性软腐病主要