实验六产淀粉酶细菌的分离筛选讲义.pptVIP

实验六 产淀粉酶细菌的分离筛选 掌握分离筛选产生淀粉酶细菌的方法 学习酶活分析 实 验 目 的 样品：新鲜土壤样品（同学自备）。 培养基：淀粉培养基。 无菌水：带有玻璃珠装有18mL无菌水三角瓶。 其它：无菌培养皿、无菌吸管、无菌离心管、电子天平、记号笔、玻璃涂棒、酒精灯、火柴。 实 验 材 料 制备土壤稀释液： 称取土壤2g，放入18mL带有玻璃珠的无菌水三角瓶中，振荡5min，即为稀释10-1的土壤悬液。然后在离心管中依次稀释至10-3、10-4 稀释度。 制备淀粉培养基平板 每组制5块牛膏蛋胨培养基平板 具体制法为：倒入融化好的牛膏蛋胨培养基约15 ml后（温度为不烫手为宜），置于桌面冷却为固体平板。在无菌培养皿底部注明分离菌名、稀释度、组别、班级。 实 验 步 骤 吸取稀释液无菌操作法分别吸取10-3、10-4 土壤稀释液0.1mL，分别加在已制好的2块淀粉平板培养基上。 涂板用涂布棒将稀释液在培养基上充分混匀铺平，静置5min 划线分离将10-1土壤稀释液用接种环挑取一环，每人在一块淀粉培养基上进行划线分离。然后倒置于恒温箱培养。看演示 培养倒置于房间37℃恒温箱培养24小时。 24小时后(定时间），在之前稀释涂布和划线的3块淀粉培养基上选取典型细菌菌落（尽量选取边缘整齐和规则的菌落），测量其菌落半径（C值）并用记号笔