5生物合成调节机理-1转录.ppt

第五章 酶的生物合成及调节机理 主要是RNA和蛋白质的生物合成过程。 第一节 RNA的生物合成—转录 RNA生物学主要功能： （1）某些RNA病毒中双链RNA是遗传信息载体； （2）蛋白质生物合成中各种RNA起重要作用； （3）作为核酸类酶起催化作用。 转录：以DNA为模板，以核苷三磷酸为底物，在RNA聚合酶的作用下，生成RNA的过程。分起始、延伸、终止，最后加工。 转录的概念和DNA的有义链和反义链 RNA合成过程 一、依赖DNA的RNA聚合酶 以DNA为模板的RNA聚合酶，又称转录酶； 1960，Harowitz,S.Weiss发现； 真核生物RNA有3种，分为RNA聚合酶I,II,III,也是聚酶，表5-1 RNA聚合酶催化的反应 大肠杆菌RNA聚合酶的结构示意图 二、转录起始 RNA合成起始点在DNA启动基因（启动子）上， 启动子( promoter)是指RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA序列。 б因子识别启动基因，又称起动因子/转录因子， RNA聚合酶起始转录需要的辅助因子（蛋白质）称为转录因子(transcriptional factor)。 全酶的作用； 起始阶段重要问题：RNA聚合酶与DNA启动基因的相互作用； 转录起点：合成RNA第一个核苷酸对应的DNA模板上的位点；采用数字表示所描述碱基对位置。 转录起始阶段主要过程 （1）全酶形成； （2）酶与模板结合； （3）酶与启动基因结合； （4）模板DNA局部变性； （5）转录开始，б因子释放。 三、RNA链延伸 由起始到延伸，酶由全酶变为核心酶； 酶分子上的β，β’亚基也发生变化，与DNA结合不专一了，使酶可沿模板DNA移动。 DNA构象也发生变化：双链逐渐解旋，按模板碱基顺序逐个加入互补核苷三磷酸，同时放出焦磷酸； 生成的多聚核苷酸链与模板分开，DNA解链又重新缠绕成双螺旋； RNA链沿5’至3’进行，50个核苷酸/s； RNA聚合酶无校对功能，差错率10-4~10-5 RNA链的延伸图解 四、RNA链合成终止 模板上含有一个终止信号—终止子或终止基因； 还需终止因子—ρ因子； 提供转录停止信号的DNA序列称为终止子( termter); 协助RNA聚合酶识别终止信号的辅助因子（蛋白质）则称为终止因子 (termination factor)。作用机制，图5-4 有的终止信号的作用可被特异的因子所阻止，使RNA聚合酶得以越过终止子继续转录，这称为通读(readthrough)，这类引起抗终止作用的蛋白质称为抗终止因子(antitermination)。 大肠杆菌两类终止子的回文结构 五、RNA前体加工 必要性：非成熟RNA分子； 包括一系列酶催化反应： （1）剪切反应： （2）剪接反应： （3）末端连接反应： （4）核苷酸修饰反应。 （一）剪切反应 从RNA前体末端切去一定大小RNA片段得到成熟RNA分子； 有关酶较多； （二）剪接反应 将RNA前体中间隔序列除去并把两端外显子连接起来形成成熟RNA分子的过程； 真核生物的tRNA,mRNArRNA往往如此； 作用酶：自我剪接酶；内切核酸酶和RNA连接酶； （三）末端连接反应 指在RNA分子3’-末端或5’-末端连接上特定核苷酸形成成熟RNA分子； 反应有： 1，tRNA3’-末端加上CCA-OH； 2，mRNA5’-末端加上“帽子”结构； 3，mRNA3’-末端加上polyA尾； 4，tRNA5’-末端加上甲基鸟苷酸 例1-原核生物中rRNA前体的加工 例2-tRNA前体分子的加工 酵母酪氨酸tRNA前体的加工 例3-真核细胞mRNA的加工 （四）核苷酸修饰反应 成熟tRNA中含有许多修饰核苷； 是在tRNA加工过程中各种酶作用生成； 表5-2。 附： RNA的拼接、编辑和再编码 大多数的真核基因都是断裂基因，断裂基因的转录产物产物需要通过拼接，去除插入部分（即内含子，intron），使编码区（即外含子，Exon）成为连续序列，这是基因表达的一个重要环节。RNA编码序列的改变称为编辑（ editing）， RNA编码和读码方式的改变称为再编码（recoding）。由于存在选择性的拼接、编辑和再编码，一个基因可以产生多种蛋白质。 RNA生物功能的多样性 RNA的降解 核酸合成的抑制剂 * * * 酶 学 彭益强 Enzymology 国立华侨大学生物工程与技术系 中心法则: DNA RNA 蛋白质 转录 翻译 遗传信息传递的 中心法则 蛋白质 翻译 转录 逆转录 复制 复制 DNA RNA 生物的遗传信息以密码的形式储存在DNA分子上，表现为特定的核苷酸排列顺序。在细胞分裂的过程中，通过DNA复制把亲代细胞所含