细胞生物学--第十一章细胞的骨架体系.ppt

* * 三、中间纤维 中间纤维（intermediate filaments，IF）直径10nm左右，介于粗肌丝和细肌丝（或微管与微丝）之间。与微管不同的是中间纤维是最稳定的细胞骨架成分，它主要起支撑作用。中间纤维在细胞中围绕着细胞核分布，成束成网，并扩展到细胞质膜，与质膜相连结。 （一）成分 IF是一类形态上非常相似，而化学组成上有明显差异的蛋白质，成分比微丝和微管都复杂，可根据组织来源的免疫原性分为5类： 角蛋白纤维（keratin filament，上皮细胞）、 结蛋白纤维（desmin filament，肌细胞）、 神经胶质纤维（neuroglial filament，神经胶质细胞）、 波形纤维（vimentin filament，间质细胞）、 神经元纤丝(neurofilament ，神经元)，此外细胞核中的 核纤肽（lamin）也是一种中间纤维。 中间纤维 中间纤维 中间纤维具有组织特异性，大多数细胞中含有一种中间纤维，但也有少数细胞含有2种以上，如骨骼肌细胞含有结蛋白和波形蛋白。 中间纤维蛋白分子由一个310个氨基酸残基形成的α螺旋杆状区，以及两端非螺旋化的球形头（N端）尾（C端）部构成。杆状区是高度保守的，由螺旋1和螺旋2构成，每个螺旋区还分为A、B两个亚区，它们之间由非螺旋式的连结区连结在一起。 中间纤维蛋白分子结构和种类 头部和尾部的氨基序列在不同类型的中间纤维中变化较大，可进一步分为①H亚区：同源区；②V亚区：可变区；③E亚区：末端区。 （二）装配 ①两个单体，形成两股超螺旋二聚体（角蛋白为异二聚体）；②两个二聚体反向平行组装成四聚体；③多个四聚体首尾相连组成原纤维；④8根原纤维组成中间纤维。 中间纤维蛋白的装配示意图 中间纤维的组装 中间纤维形成的模型 几种中间纤维模式图 中间纤维分类与分布 （三）中间纤维结合蛋白 中间纤维的结合蛋白（intermediate filament associated protein，IFAP）已报道有15种左右，分别与特定的中间纤维结合。如：flanggrin使角蛋白交联成束；Plectin将波形蛋白纤维与微管交联在一起；Ankyrin 把结蛋白纤维与质膜连在一起等。 （四）功能 在细胞中起支架作用，与核定位有关，与核内基因组的功能有关。 特异性药物？ 第二节 细胞核骨架 (狭义的仅指核基质，广义的指核基质，核纤层和核孔复合体) 1，形态结构 核骨架纤维直径3-30nm，为网络状的骨架 细胞核分级抽提技术和非树脂包埋－去包埋剂技术 2，成分： DNA Topo II；核基质蛋白(D, E, F, C4等) （DNA-loop的结合蛋白）；Nuc2+蛋白（与富含AT的DNA序列有特异亲和性）； ARBP（与MAR序列结合）； H1（与维持染色体高级结构有关）； 着丝粒缢痕结合蛋白，HMG 1,2（识别富含AT序列）； 核纤层蛋白A,B（将染色质锚定于核纤层）；核仁蛋白（与富含T的序列结合）等。 3，核骨架结合蛋白： 转录因子（有DNA序列特异性） 酶：组蛋白乙酰化和去乙酰化酶，DNA聚合酶 α和β， 酪氨酸激酶。 受体：一些激素（肾上腺皮质激素，雄激素， 雌激素，甲状腺素）的受体。 供体：视网膜母细胞瘤蛋白。 其它：B23，肌动蛋白等。 4，核骨架结合序列 核骨架蛋白与富含AT的DNA序列（MAR和SAR）结合， 核骨架结合序列位于活性转录基因的两端（富含AT，富含DNA解旋元件，富含反向重复序列，富含转录因子结合位点），估计每个细胞有十万个MAR。 5，功能 ①参与DNA复制；复制起始点是MAR，DNA 聚合酶与核骨架结合而被激活 ②活性基因和RNA聚合酶结合于核骨架上， RNA合成在核骨架上进行 ③与病毒的复制有关 ④参与染色体的构建 核骨架和细胞骨架 核孔复合体和核骨架 *