提取及常见问题解决方案.pptVIP

DNA提取原则 一、标本的要求和保存 血液 EDTA做抗凝剂，不可用肝素 RNA 尽快提取或者-20℃保存 DNA 4℃短期保存 组织 新鲜组织 液氮罐保存（-80℃） 石蜡玻片和包埋组织 应没有H.E染色 室温保存 核酸提取的一般过程 I.材料准备 II.破碎细胞或包膜－内容物释放 III.核酸分离、纯化 IV.沉淀或吸附核酸，并去除杂质 V.核酸溶解在适量缓冲液或水中 1）破碎细胞（防止核酸酶的作用） ①机械方法：研磨法、匀浆法； ②物理法；反复冻融，总热骤冷法、超声波法 ③化学及生物法，自溶法 用SDS处理细胞、渗透法 蛋白酶K法 、溶菌酶 2）DNA的纯化 根据核酸的性质和特点除去提取过